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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
28
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 安康鱼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P4220 |
【检验原理】
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品DNA模板,引物和探针经过优化,灵敏性高,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标DNA高度保守区设计,不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应,既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级,本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】
【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有N个样品,最好设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取:核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应(20μL体系,在样品制备室进行)
3.1如果做定量分析并且只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复,则标记N+4个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),1个用于PCR阳性对照(直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板)。
| 大鼠低氧诱导因子2α(HIF2α)ELISA试剂盒 ,英文名: HIF2α ELISA Kit | 大鼠血小板因子3(PF-3)ELISA 试剂盒 96T/48T | Anti-OX40/CD134/TNFRSF4 CD134抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
| 人肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D)ELISA 试剂盒 96T/48T | 小鼠凋亡信号调节激酶I(ASK-1)ELISA 试剂盒 96T/48T | Anti-TGF-alpha 转移生长因子–α抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
| 大鼠透明质酸结合蛋白1(HABP1)ELISA试剂盒 ,英文名: HABP1 ELISA Kit | 大鼠前动力蛋白受体1(PKR1)ELISA试剂盒 ,英文名: PKR1 ELISA Kit | Anti-CD44v4 CD44V4抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
| 兔子血纤蛋白原降解产物(FDP)ELISA 试剂盒 96T/48T | 人胰岛素(INS)ELISA 试剂盒 96T/48T | Anti- Beta-lactoglobulin/FITC 荧光素标记β-乳球蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| 大鼠抗心0脂抗体IgM(ACA-IgM)ELISA 试剂盒 96T/48T | 人T细胞急性淋巴母细胞白血病相关抗原(TALLA-1/CD231)ELISA 试剂盒 96T/48T | Anti-TRAF2 坏死因子受体相关因子2抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
| 人伤寒抗原(St-Ag)ELISA 试剂盒 96T/48T | Anti-Smad 1/FITC 荧光素标记Smad 1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Anti-CHRNA2/FITC 荧光素标记型乙酰胆碱受体A2(神经型)抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| 鸡神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA 试剂盒 96T/48T | Anti-VDAC/FITC 荧光素标记电压依赖性阴离子通道抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Anti-DFF-40beta/CAD/CPAN Caspase 激活的脱氧核糖核酸酶抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
| 小鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA 试剂盒 96T/48T | 安康鱼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒Anti-VE-cadherin/CD/VECD/FITC 荧光素标记上皮型钙粘附分子/血管内皮钙粘蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Anti-ECP/FITC 荧光素标记抗嗜酸性粒细胞阳离子蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| 大鼠核转录因子p65(NF-kB p65)ELISA 试剂盒 96T/48T | Anti-phospho Histone H1,4(Ser27) 0酸化组蛋白H1,4样蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml | Anti-RAD51C 癌和卵巢癌易感基因RAD51C抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
| 人抗脑组织抗体(ABAb)ELISA 试剂盒 96T/48T | Anti-IL-1R II /FITC 荧光素标记白介素1受体Ⅱ抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Anti-SSTR3/FITC 荧光素标记生长抑素受体3(SSTR3)抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
【注意事项】
1.PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2.试剂盒各组分使用前应充分融化混匀,离心数秒后使用。
3.各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4.待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
5.样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6.PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7.本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
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文献和实验如果您的样本是组织,取样的过程非常重要。组织内部是有内源性 RNase 存在的,组织离体后内源性 RNase 则开始发挥作用,RNA 产生降解。所以离体的组织必须立马放在液氮中速冻,之后转移至 -80℃ 长期保存,且避免反复冻融。研磨组织的过程中需要保证在液氮环境中研磨。RNA 提取的过程中,保证样本的上样量不超过提取试剂盒说明书中规定的最大上样量,上样量过多,同样会造成 RNA 降解。 ②如果您的样本是细胞,则样本搜集过程要简单的多了,只要保证细胞状态良好(细胞状态差也容易造成提取的 RNA 降解
标记(生物素、荧光、地高辛和Eu3+等)、引入与蛋白质结合的DNA序列、引入突变位点、插入与缺失突变序列和引入启动子序列等。 2 特定PCR的引物设计 在尽量遵循引物设计基本原则的同时,根据不同的实验目的,需要注意一些相应的事项,总结如下: 01 荧光定量PCR 荧光定量PCR有染料法和探针法两种。染料法只需要设计引物,而探针法除设计引物之外还得设计一条探针。 引物设计要尽量满足以下要求: 确保模板是cDNA
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