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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
23
- 英文名:
Trichinella pseudospiralis
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 伪旋毛虫探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P4135 |
【检验原理】
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品DNA模板,引物和探针经过优化,灵敏性高,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标DNA高度保守区设计,不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应,既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级,本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】
【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有N个样品,最好设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取:核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应(20μL体系,在样品制备室进行)
3.1如果做定量分析并且只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复,则标记N+4个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),1个用于PCR阳性对照(直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板)。
| Porcine myeloperoxidase (MPO) ELISA Kit 猪髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒 | Anti-Phospho-MKP1 (Ser296 + Ser318)/FITC 荧光素标记0酸化原活化蛋白激酶0酸酶-1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| 小鼠β2糖蛋白1抗体IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)免疫试剂盒 Mouse β2-glycoprotein 1 aibody IgA/G/M,β2-GP1 IgA/G/M ELISA Kit | Anti-HisX6/6His/His tag(CT)/HRP 辣根过氧化物酶标记聚组氨酸抗体/抗His tag标签抗体(C端)IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| 人微管相关蛋白tau(MAPT)抗体免疫试剂盒 Human microtubule-associated protein tau (MAPT) aibody ELISA kit | ADAM8(Mouse A Disintegrin And Metalloprotease 8) ELISA KIT 小鼠解整合素样金属蛋白酶8Multi-class antibodies规格: 48T |
| Human exacellular signal regulated kinase (ERK) ELISA Kit 人细胞外信号调节激酶(ERK)ELISA试剂盒 | sTRAIL(Human soluble tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand) ELISA KIT 人可溶性坏死因子相关凋亡诱导配体Multi-class antibodies规格: 48T |
| 人白介素9(IL-9)ELISA检测试剂盒HumanIerleukin9,IL-9ELISAKIT 96T/48T | Anti-Caspase-12(hunman)/FITC 荧光素标记半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗体(人)IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| 小鼠乙型肝炎表面抗体(HBsAb)免疫试剂盒 Mouse hepatitis B virus surface aibody,HBsAb ELISA Kit | IL-1 Beta 人白介素-1βMulti-class antibodies规格: 48T |
| 人载脂蛋白A2(apo-A2)免疫试剂盒 Human Apolipoprotein A2,apo-A2 ELISA Kit | LTC4 ELISA Kit 大鼠白三烯C4Multi-class antibodies规格: 48T |
| Human heparan sulfate proteoglycan (HSPG) ELISA Kit 人肝素糖蛋白(HSPG)ELISA试剂盒 | OAT-1 (Organic anion transporter 1)mouse、rat 阴离子转运蛋白-1(大、小鼠同源:人源见bs-0606P)Multi-class antibodies规格: 0.5mg |
| 人前列腺素E2(PGE2)免疫试剂盒 Human Prostaglandin E2,PGE2 ELISA Kit | Anti-Fibulin-5/FITC 荧光素标记抗“衰老关键蛋白”抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| 小鼠抗胰蛋白酶(AT)免疫试剂盒 Mouse Ai-ypsin,AT ELISA Kit | Amylin ELISA Kit 大鼠胰淀素Multi-class antibodies规格: 48T |
| 人前纤维蛋白1免疫试剂盒 Human Profilin 1 ELISA Kit | BK(Mouse bradykinin) ELISA Kit 小鼠血管舒缓激肽Multi-class antibodies规格: 48T |
| Rat endothelial niic oxide syhase 3 (eNOS-3) ELISA Kit 大鼠内皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA试剂盒 | midnolin isoform Protein 1 中脑核仁蛋白1(抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg |
| 人可溶性细胞因子受体(sCKR)ELISA检测试剂盒Humansolublecytokinereceptor,sCKRELISAKit 96T/48T | 伪旋毛虫探针法荧光定量PCR试剂盒Human thrombin-antithrombin complex,TAT ELISA Kit 人凝血酶抗凝血酶复合物Multi-class antibodies规格: 48T |
| 猪脂肪酸合成酶(FAS)免疫试剂盒 Pig fatty acid syhase,FAS ELISA kit | Flt-3L(Human FMS-like tyrosine kinase 3 ligand) ELISA Kit 人FMS样酪氨酸激酶3配体Multi-class antibodies规格: 48T |
| 兔子白介素1α(IL-1α)免疫试剂盒 Rabbit Ierleukin 1α,IL-1α ELISA Kit | LTC4(Human Leukotriene C4) ELISA Kit 人白三烯C4Multi-class antibodies规格: 48T |
【注意事项】
1.PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2.试剂盒各组分使用前应充分融化混匀,离心数秒后使用。
3.各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4.待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
5.样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6.PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7.本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
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所特有的,下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率,把引物二聚体调整到越小越好;探针法则需要设计荧光探针,这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个:完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上;这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置,根据自己试验情况而定,本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
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