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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
57
- 英文名:
Treponema vincentii
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 文氏密螺旋体探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P4130 |
原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
包装规格及成分:
使用方法:
一、样品 RNA 的制备
1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意:可以选用本公司 的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆转录)反应合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系(20 μL 体系)
2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。
3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆转录酶(含 RI),
反应终体积为 20μL。
4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。
5. 70℃保温 10 分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用,丌需要纯化。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
公司正在出售的产品:
| MouseStemcellfactor/mastcellgrowthfactor,SCF/MGFELISAKit小鼠干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Rhesus antibody Rh ALAS1/ALAS-H 5-氨基乙酰合酶1抗体 规格 0.2ml |
| 细胞外基质0酸糖蛋白(MEPE)ELISA试剂盒 ,英文名: MEPE ELISA Kit | Rhesus antibody Rh 2,4-D(24D1) 2,4-二氯苯氧乙酸(除草剂)单克隆抗体 规格 0.1ml |
| 仓鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B) 免疫试剂盒 Hamster maix metalloproteinase 9/Gelatinase B,MMP-9 ELISA Kit | Rhesus antibody Rh Donkey Anti-human IgG/HRP 辣根过氧化物酶标记的驴抗人IgG 规格 0.1ml |
| humanai-neuophilcytoplasmicaibody,cANCAELISAKit 人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | Rhesus antibody Rh MAOA 单氨氧化酶A抗体 规格 0.1ml |
| MouseinhibinB,INH-BELISAKit小鼠抑制素B(INH-B)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Rhesus antibody Rh CDK7 周期素依赖性激酶7抗体 规格 0.1ml |
| 狂犬病毒(RV)核酸检测试剂盒(-PCR法) 48T | Rhesus antibody Rh PEG3 PEG3蛋白抗体 规格 0.1ml |
| 酪酸羟化酶(TH)ELISA试剂盒 ,英文名: TH ELISA Kit | Rhesus antibody Rh GLP-2 胰高血糖素样肽-2抗体 规格 0.1ml |
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| Mousenicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISAKit小鼠烟酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Rhesus antibody Rh CCL21/6Ckine 淋巴细胞趋化因子CCL21抗体 规格 0.1ml |
| 早老素1(PS-1)ELISA试剂盒 ,英文名: PS-1 ELISA Kit | Rhesus antibody Rh GLUT1 葡萄糖转运蛋白1抗体 规格 0.1ml |
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| HumanHemolyticcompleme,HcELISAKit 人溶血补体(Hc)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | Rhesus antibody Rh PAR4 蛋白酶活化受体4抗体 规格 0.1ml |
| 组织及血液酸性0酸酶(ACP)测试盒 可见分光光度法 50管/24样 | 文氏密螺旋体探针法荧光定量PCR试剂盒Rhesus antibody Rh CPI17 alpha 蛋酸激酶PKC/CPI-17抗体 规格 0.1ml |
| HumaeceptorⅠfoheFcregionofimmunoglobulinE,FcεRⅠELISAKit 人免疫球蛋白EFc段受体Ⅰ(FcεRⅠ)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | Rhesus antibody Rh KIZUNA/C20orf19 20号染色体开放阅读框19抗体 规格 0.2ml |
| 疱疹抗体(HG)ELISA试剂盒 ,英文名: HG ELISA Kit | Rhesus antibody Rh IRS1 胰岛素受体底物-1抗体 规格 0.2ml |
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文献和实验相关专题 实验室很多同学都要做Real time PCR实验,实验室的师兄师姐都会有很多宝贵意见,不过也有实验室前没有做过的,查找了下资料和大家分享下关于实时荧光 Taqman 探针设计、实时荧光PCR探针的选择、引物的设计及评价。 荧光探针法是用序列特异的荧光标记探针来检测产物,探针法的出现使得定量PCR技术的特异性比常规PCR技术大大提高。目前较常提及的有TaqMan探针、FRET杂交 探针(荧光共振能量传递探针)和分子
所特有的,下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率,把引物二聚体调整到越小越好;探针法则需要设计荧光探针,这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个:完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上;这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置,根据自己试验情况而定,本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
上的DNA定量。这是DNA定量技术的一次飞跃。 根据最终得到的数据不同,定量PCR可以分为相对定量和绝对定量两种。典型的相对定量如比较经过不同方式处理的两个样本中基因表达水平的高低变化,得到的结果是百分比;绝对定量则需要使用标准曲线确定样本中基因的拷贝数或浓度。根据所使用的技术不同,荧光定量PCR又可以分为TaqMan探针和SYBR Green I荧光染料两种方法。比较而言,探针杂交技术在原理上更为严格,所得数据更为精确;荧
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