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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
28
- 英文名:
Tarsonemus spp.
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 跗线螨属通用探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P4101 |
原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
包装规格及成分:
使用方法:
一、样品 RNA 的制备
1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意:可以选用本公司 的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆转录)反应合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系(20 μL 体系)
2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。
3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆转录酶(含 RI),
反应终体积为 20μL。
4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。
5. 70℃保温 10 分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用,丌需要纯化。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
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文献和实验捕食性柞蚕害虫之一,主要危害1-2龄柞蚕。属蟹蛛科,蜘蛛目,学名为Xysticus ephippiafus Simon。为害柞蚕的蜘蛛种类很多,分布广,全国各柞蚕区均有发生。在辽宁地区已发现害蚕蜘蛛26种,主要种类除鞍形花蟹蛛外,还有三突花蛛、刺跗逍遥蛛、隆肩圆蛛等。 形态 成蛛中雌蛛体长7-8mm,体褐色或浅黄褐色,头胸背面两侧有黑褐色纵纹;中央浅褐色,并有一条浅褐色线。头胸部前缘有数根黑刺。第一、二对步足比后两对均长,且粗大,色泽较深,有深褐色斑点。雄蛛体长4-5
所特有的,下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率,把引物二聚体调整到越小越好;探针法则需要设计荧光探针,这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个:完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上;这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置,根据自己试验情况而定,本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
腹面两侧。腹部末端有3对纺绩突起。 (五)蝎:属蛛形纲蝎目,体褐色,可分为头胸部及腹部。头胸部短,具头胸甲,有眼3对,附肢6对。腹部较长,又可分为宽大的前腹部及狭长的后腹部;腹部分节明显,腹部末端膨大为尾刺,内有毒腺。 (六)螨:属蛛形纲蜱螨目,体细小,椭圆形。头胸部与腹部完全愈合而不分节,具4对步足。螯肢及脚须向体前端突出形成假头。 (七)马陆:属多足纲,体呈圆筒形或背腹略扁平,可分为头部与躯干部。触角1对,细长。体节多,除前4节及末节外
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