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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
23
- 英文名:
Porcine Adenovirus(Swine Adenovirus)
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 猪腺病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P3930 |
【检验原理】
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品DNA模板,引物和探针经过优化,灵敏性高,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标DNA高度保守区设计,不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应,既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级,本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】
【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有N个样品,最好设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取:核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应(20μL体系,在样品制备室进行)
3.1如果做定量分析并且只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复,则标记N+4个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),1个用于PCR阳性对照(直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板)。
| 细胞色素C蛋白免疫共沉淀分析试剂盒5次 | HumanHeatShockProtein90,HSP-90ELISA试剂盒人热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Anti-GAPDH 兔抗3-0酸甘油醛脱氢酶单克隆抗体(内参抗体)Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
| ELISAKitFSH兔子促卵泡素规格:48T/96T | 植物细胞周期G2期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒10次 | Anti-SPY spindly抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
| 石蜡切片特恩布尔(TURNBULL)铁(二价)染色试剂盒50次 | 食物(CO2)浓度酶偶联反应比色法定量检测试剂盒20次 | Anti-DCC 结肠直肠癌缺失基因抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
| 组织HCK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次 | 组织科萨基病毒A(CoxsackievirusA)定性检测试剂盒20次 | Anti-NCF/NCF4/p40phox/FITC 荧光素标记嗜中性粒细胞胞浆因子4抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| Humanmicrotubule-associatedprotein2,MAP-2ELISA试剂盒人微管相关蛋白2(MAP-2)ELISA试剂盒规格:96T/48T | HumanAndrostenedione,ASDELISA试剂盒人雄烯二同(ASD)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Anti-PS-1(CT) 早老素蛋白-1抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
| ELISAKitBAX猪Bcl-2相关X蛋白规格:48T/96T | Anti-RhoC /FITC 荧光素标记RhoC抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Anti-Beta-casein( Beta-casein)/FITC 荧光素标记 β-酪蛋白(抗体)IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| HumanCoxsackievirusIgG,CoxV-IgGELISA试剂盒人柯萨奇病毒IgG(CoxV-IgG)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Anti-Integrin- Alpha V/CD49e /FITC 荧光素标记整合素αV抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Anti-CDKN1C/p57 Kip2 周期蛋白依赖激酶抑制因子1C抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
| 载玻片细胞CDK4蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次 | 猪腺病毒探针法荧光定量PCR试剂盒Anti-AR Alpha1/FITC 荧光素标记α1能受体抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Anti-ECM1/FITC 荧光素标记细胞外基质蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| HumanOsteopoin,OPNELISA试剂盒人骨桥素(OPN)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Anti-Granzyme D/B/E/N/G/F/H 颗粒酶D/B/E/N/G/F/H抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml | Anti-GPA/GYPA/CD235a 血型糖蛋白A(涎糖蛋白)抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
| ELISAKitCF小鼠睫状神经营养因子规格:48T/96T | Anti-GDNF/FITC 荧光素标记胶质细胞源性神经营养因子抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Anti-PPAR alpha α型-过氧化酶活化增生受体抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
【注意事项】
1.PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2.试剂盒各组分使用前应充分融化混匀,离心数秒后使用。
3.各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4.待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
5.样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6.PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7.本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
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文献和实验。临床诊断的品种如HBV/HCV及禽流感诊断试剂盒性能优良、供应充足,基本实现国产化。在猪流感病毒RNA核酸序列明确的情况下,利用现有的试剂研发平台,人感染猪流感实时荧光定量PCR诊断试剂盒很快就会面世。实时荧光定量PCR技术在猪流感诊断中的作用已有法规确立在人感染猪流感病毒出现以前,针对猪与猪传染的传统猪流感疫情,近年来我国科技人员经过不懈努力,探索快速检测与诊断方法].人感染猪流感疫情发生后,美国疾病预防控制中心(CDC)于2009年4月28日发布了针对人感染猪流感病毒治疗和预防临时指南
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所特有的,下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率,把引物二聚体调整到越小越好;探针法则需要设计荧光探针,这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个:完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上;这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置,根据自己试验情况而定,本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
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