Bioskryb PTA技术-单细胞全基因组扩增技术

 

BioSkryb 的 ResolveDNA™采用PTA (Primary Template-directed Amplification）原代模板定向扩增技术，采用抗核酸外切酶活性的终结子 (化学修饰的核苷酸) 实现拟线性扩增 (quasi-linear process)，绝大多数扩增子来源于原始模板的扩增，扩增产物无法再次被复制，因此扩增过程产生的错误不会被放大，并且Phi29 DNA 聚合酶可减少扩增错误率，此外，还可以扩增线粒体基因组 (Mitochondrial Genome)。
 

PTA技术亮点

1）PTA技术具有较好的覆盖度

由下图可见，PTA的基因组覆盖度最接近Bulk测序的水平，其覆盖度达到95%以上
 

 

2）PTA技术具有较好的分辨率和均一性
 

 

3）PTA技术具有较好的保真性
 

 

4）PTA技术具有较好的收率和重现性

为了验证PTA技术具有较好的收率和重现性，该实验中加了质控DNA（1ng到10pg）、单个细胞起始量、5个细胞起始量。

可以看到在单细胞层面，经PTA扩增后，单细胞基因组从6pg起始能达到1.5-2ug的水平，可满足后续的建库流程及PCR-Free的流程。

 

5）PTA技术同时获取线粒体基因组数据

如下图所示，使用PTA技术对单细胞基因组进行扩增，除了获得基因组上的数据之外，同时获得了线粒体基因组上的结果。

PTA技术的应用领域

*本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断流程