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PTA
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NA
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长期
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上海仁科生物科技有限公司
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BioSkryb 的 ResolveDNA™采用PTA (Primary Template-directed Amplification)原代模板定向扩增技术,采用抗核酸外切酶活性的终结子 (化学修饰的核苷酸) 实现拟线性扩增 (quasi-linear process),绝大多数扩增子来源于原始模板的扩增,扩增产物无法再次被复制,因此扩增过程产生的错误不会被放大,并且Phi29 DNA 聚合酶可减少扩增错误率,此外,还可以扩增线粒体基因组 (Mitochondrial Genome)。

PTA技术亮点
1)PTA技术具有较好的覆盖度
由下图可见,PTA的基因组覆盖度最接近Bulk测序的水平,其覆盖度达到95%以上

2)PTA技术具有较好的分辨率和均一性

3)PTA技术具有较好的保真性

4)PTA技术具有较好的收率和重现性
为了验证PTA技术具有较好的收率和重现性,该实验中加了质控DNA(1ng到10pg)、单个细胞起始量、5个细胞起始量。
可以看到在单细胞层面,经PTA扩增后,单细胞基因组从6pg起始能达到1.5-2ug的水平,可满足后续的建库流程及PCR-Free的流程。

5)PTA技术同时获取线粒体基因组数据
如下图所示,使用PTA技术对单细胞基因组进行扩增,除了获得基因组上的数据之外,同时获得了线粒体基因组上的结果。

PTA技术的应用领域

*本产品仅限科研使用,不可用于临床诊断流程
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