- ￥3490
- gelatins
- 国内
- JLC-G11416
- 2025年11月24日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
避光/低温保存
- 保质期：
12个月
- 英文名：
传染性造血器官坏死病病毒RT-PCR试剂盒
- 库存：
大量
- 供应商：
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 规格：
50次
产品及特点：
传染性造血器官坏死病病毒(Infectious Hematopoietic Necrosis Virus,IHNV)是一种 RNA 病毒，多传染鱼类，引起鱼传染性造血器官坏死病，是一种毒力很强的弹状病毒所引起的急性、全身性的严重传染病，常发生于鳟鱼和太平洋大马哈鱼的鱼苗和种鱼。鱼传染性造血器官坏死病爆发时，首先出现稚鱼和幼鱼的死亡率突然升高。受侵害的鱼通常出现昏睡症状，不愿活动和避开水流；但也有的鱼表现狂窜、打转等反常现象。患病鱼眼球突出且变黑，腹部膨胀，肛门处拖着不透明或棕褐色的假管型粘液粪便是较为典型的特征，但并非该病所独有。鱼鳃苍白，鳍基部出血，该病的发生会给养殖业造成较大的经济损失，因此传染性造血器官坏死病病毒的快速准确鉴定对该病的预防和检疫有着重要作用。为此本公司开发了本产品，可用于在科研领域快速定量检测传染性造血器官坏死病病毒。
1. 一站式，用户不需要单独准备每种成分，包括引物和对照。
2. 根据传染性造血器官坏死病病毒的保守基因序列设计的引物，具有良好的特异性。
3. 灵敏度可以达到1000拷贝/反应。
4. 使用一管式 RT-PCR 技术，RT 和 PCR 两步在一个试管内完成，不需要中间转移样品，降低了操作误差和可能的污染。
5. 本产品足够50次20μL体系的RT-PCR。
6. 本产品由江蓝纯生物提供，不得用于临床诊断。
规格及成分：
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | 5×双酶一管式 RT-PCR Buffer | 200 μL（橘黄盖） |
| 试剂二 | MMLV-Taq Mix | 75 μL（红盖) |
| 试剂三 | 超纯水 | 1 mL（亮黄盖） |
| 试剂四 | 传染性造血器官坏死病病毒RT-PCR 引物混合液 | 100 μL（白盖） |
| 试剂五 | 传染性造血器官坏死病病毒RT-PCR阳性对照（1×10E8 /μL） | 50 μL（黄盖） |
| 试剂六 | 使用手册 | 1 份 |
运输及保存：
低温运输，-20℃保存，保存期限为 12 个月。收到货后阳性对照需要跟其他成分分开放置，因为其容易污染其他成分，造成假阳性。
自备试剂：
样品 RNA。
传染性造血器官坏死病病毒RT-PCR试剂盒
使用方法：
一、样品 RNA 的制备：
1. 如果有 N 个样品，必须设置 N+2 个提取，多出的一个是 PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL 传染性造血器官坏死病病毒PCR阳性对照的 1000 倍稀释液作为制备的阳性对照。可以用水作为制备的阴性对照。制备所得成为样品 RNA。
2. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 RNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 RNA 提取试剂盒兼容。可以选购本公司的柱式病毒 RNAout。
二、设置 RT-PCR 反应（20μL 体系）：
3.如果有 N+2 个样品，则标记 N+4 个 PCR 管（额外增加的两个管一个是RT-PCR 阳
性对照，另一个是 RT-PCR 阴性对照）并按照下表在 PCR 管中加入下列成分：
| 成份 | N+2 个 样品管 |
RT-PCR 阴性对照 |
RT-PCR 阳性对照 |
| 5×双酶一管式RT-PCR Buffer | 各 4 μL | 4 μL | 4 μL |
| 传染性造血器官坏死病病毒RT-PCR引物混合液 | 各 2 μL | 2μL | 2μL |
| N+2个制备的 RNA 样品 | 各 12.5μL | -- | -- |
| 超纯水 | -- | 12.5μL | -- |
| 传染性造血器官坏死病病毒RT-PCR阳性对照的1000倍稀释液 | -- | -- | 12.5μL |
| MMLV-Taq Mix | 1.5 μL | 1.5 μL | 1.5 μL |
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 逆转录 | 42℃ | 30 min |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR反应(35个循环） | 95℃ | 30 sec |
| 58℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 20 sec | |
| 延伸 | 72℃ | 7 min |
5. 琼脂糖电泳检测扩增效果。如果阴性对照有扩增产物或阳性对照无扩增产物，则说明实验失败，需要分析实验失败的原因。只有在阴性对照没有扩增产物、阳性对照必须有预期条带出现，才有必要分析样品的实验结果，如果有预期片段大小的扩增产物则为阳性，如果无则为阴性。
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文献和实验传染性皮下及造血组织坏死病毒（Infectious hypodermal and hematopoietic necrosis virus，IHHNV）属细小病毒科，病毒粒子直径约20纳米，单链DNA，该病毒感染外胚层组织，如鳃、表皮、前后肠上皮细胞、神经索和神经节，以及中胚层器官，如造血组织、触角腺、性腺、淋巴器官、结缔组织和横纹肌，在宿主细胞核内形成包涵体。对虾传染性皮下及造血组织坏死病，又名慢性矮小残缺综合征（runt-deformity syndrome，RDS），1981年在美国
部、国家质检总局发布的《中华人民共和国进境动物检疫疫病名录》中的二类动物传染病，是由牛病毒性腹泻病毒 (BVDV) 引起的以牛的黏膜发炎、糜烂、坏死和腹泻为特征的接触性传染性疾病。本病大多呈隐性感染，牛群中有很高的感染率。带毒牛的分泌物或排泄物，尤其是急性发热期病牛的血液中含有大量病毒，鹿、羊、猪等也可携带和传播本病。为控制本病的流行并加以消灭，必须采取检疫、隔离、净化、预防等兽医防制措施。北京国检局有关负责人介绍，本案涉案人员已涉嫌触犯我国刑法中的「妨害动植物防疫、检疫罪」，这是刑法修正案 (七
健康动物对各种刺激的耐受性一般比不健康、有病的动物要大，实验结果稳定，因此一定要选用健康动物进行实验，患有疾病或处于衰竭、饥饿、寒冷、炎热等条件下的动物，均会影响实验结果，选用的动物应没有该动物所特有的疾病，如小鼠的脱脚病（鼠痘）、病毒性肝炎和肺炎、伤寒；大鼠的沙门氏菌病、病毒性肺炎、化脓性中耳炎；豚鼠的维生素C缺乏症、传染性肺炎，沙门氏菌病；家兔的球虫病、巴氏杆菌病；狗的狂犬病、犬瘟热；猫的传染性白细胞减少症肺炎、猕猴的结核病，肺炎、痢疾等。常用实验动物的主要传染病的病原体、症状、病理所见
