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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
25
- 英文名:
Lump Skin Disease Virus(LSDV)
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 疙瘩皮肤病病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P3736 |
【检验原理】
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品DNA模板,引物和探针经过优化,灵敏性高,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标DNA高度保守区设计,不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应,既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级,本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】
【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有N个样品,最好设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取:核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应(20μL体系,在样品制备室进行)
3.1如果做定量分析并且只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复,则标记N+4个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),1个用于PCR阳性对照(直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板)。
| Anti-GRM5/FITC 荧光素标记代谢型谷氨酸受体5抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | AQP0: 水通道蛋白0抗体 0.1ml |
| PLAGL1: 多型性腺瘤基因样蛋白1抗体 0.1ml | Rhesus antibody Rh CCDC70 卷曲螺旋结构域蛋白70抗体 规格 0.2ml |
| Anti-phospho-CBL2(Tyr731) /FITC 荧光素标记0酸化原癌蛋白CBL2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | IRAP(Human ICE protease-activating factor) ELISA Kit 人ICE蛋白酶激活因子 96T |
| IGFBP4 Others Human 人 IGFBP4 人细胞裂解液 (阳性对照) | Anti-IQGAP1/FITC 荧光素标记支架蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| CDCP1 Others Mouse 小鼠 CDCP1 人细胞裂解液 (阳性对照) | phospho-P53(Ser46): 0酸化抑制基因P53抗体 0.1ml |
| 小鼠成肌细胞;C2C12 | Anti-A Raf/ARAF/FITC 荧光素标记A-Raf抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| Rhesus antibody Rh phospho-TNIK(Ser769) 0酸化TRAF2和NCK激酶相互作用蛋白抗体 规格 0.1ml | PHB(Prohibitin) 抑制素/抑制因子抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg |
| Rhesus antibody Rh IgG/Gold 胶体金标记的羊抗小鼠IgG 规格 0.5ml | HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/14/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
| ROCK2 (Rho-associated coiled-coil containing protein kinase 2) Rho相关蛋白激酶2抗原 0.5mg | 615小鼠状肺腺癌瘤株;P615 |
| Calretinin: 钙结合蛋白抗体 0.1ml | CL-0279WL1(大鼠肺细胞)5×106cells/瓶×2 |
| Gemin 1: 脊髓性肌症蛋白SMA抗体 0.2ml | Spike Others SARS SARS Spike S1 Subunit 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
| Anti-LRIG2 LRIG2抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml | BRL-3A(大鼠正常肝细胞) 5×106cells/瓶×2 |
| Kim-1(Mouse Kidney injury molecule 1) ELISA KIT 小鼠肾损伤分子1Multi-class antibodies规格: 48T | 疙瘩皮肤病病毒探针法荧光定量PCR试剂盒MAPK13 Others Human 人 p38 delta / MAPK13 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
| 14-3-3 epsilon: 14-3-3E蛋白抗体 0.2ml | 非洲绿猴细胞 英文名称: VERO |
| ZNF239: 锌指蛋白239抗体 0.2ml | 人胰腺星状细胞完全培养基 100mL |
【注意事项】
1.PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2.试剂盒各组分使用前应充分融化混匀,离心数秒后使用。
3.各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4.待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
5.样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6.PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7.本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
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文献和实验荧光定量PCR的应用 分子生物学研究1、核酸定量分析。 对传染性疾病进行定量定性分析,病原微生物或病毒含量的检测 , 比如近期流行的甲型H1N1流感, 转基因动植物基因拷贝数的检测,RNAi 基因失活率的检测等。2 、基因表达差异分析。 比较经过不同处理样本之间特定基因的表达差异 ( 如药物处理、物理处理、化学处理等 ) ,特定基因在不同时相的表达差异以及cDNA芯片或差显结果的确证3 、SNP 检测。检测单核苷酸多态性对于研究个体对不同疾病的易感性或者个体
实时荧光定量 PCR 技术(Quantitative Real-time PCR,简称 qPCR)是在 PCR 扩增过程中,通过实时监测荧光信号的变化,达到对待检测样本中初始模板定量分析的方法。当前 qPCR 技术被广泛应用于临床疾病诊断,动物疾病监测,食品安全分析等领域。随着 2020 年新冠疫情在全球的蔓延,qPCR 技术更是因其检测通量高,速度快,操作简便等优势成为新冠病毒核酸检测的有效方法被众人所熟知。 那么为了得到可靠、准确的检测结果,我们需要注意哪些方面呢?其实决定一次实验成功
如何获得高质量、高可信度的荧光定量PCR结果--高质量cDNA标准
过程,无RNA损失。这就需要裂解液即可迅速裂解细胞,高效的保护RNA,又不会影响高效反转录反应,且对于后续荧光定量PCR无抑制作用。FastLine细胞到cDNA快速制备试剂盒(KR105,TIANGEN),一站式完成从细胞到cDNA的快速制备,同时去除基因组DNA残留,整个操作流程仅需50 min,获得的cDNA不但可以直接进行荧光定量 PCR还可以和正常提取RNA后进行第一链反转录后得到的cDNA一样,冷冻保存供以后使用,是从少量细胞快速制备cDNA的最佳选择,并可实现高通量检测。 图
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