- ￥4490
- 联祖
- LZ-P3714
- 国产
- 2025年07月07日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
42
- 英文名：
Kudoa septempunctata
- 保质期：
保存期限为12个月
- 供应商：
上海联祖
- 保存条件：
-20℃保存
- 规格：
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 七星库道虫探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P3714 |
【检验原理】
本试剂盒即开即用，用户只需要提供样品DNA模板，引物和探针经过优化，灵敏性高，提供阳性对照，便于区分假阴性样品，特异性高，引物是根据指标DNA高度保守区设计，不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应，既可用于定性检测，又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级，本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】
【使用方法】
试剂准备（试剂准备区）
稀释标准曲线样品（以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例）。
由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2，1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液，最好用带芯枪头，下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头，在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理（样本处理区）
2.1如果有N个样品，最好设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取：核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂，操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应（20μL体系，在样品制备室进行）
3.1如果做定量分析并且只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复，则标记N+4个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），1个用于PCR阳性对照（直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板）。
| Anti-Phospho-p63 (Ser455)/FITC 荧光素标记0酸化P63抑制基因抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | DSIP(Human delta sleep-inducing peptide) ELISA Kit 人促睡眠肽 96T |
| HDV IgM(Human Hepatitis D virus IgM) ELISA Kit 人丁型肝炎IgMMulti-class antibodies规格： 48T | Rhesus antibody Rh SNF5 转录调控激活蛋白SNF5抗体 规格 0.2ml |
| Mre11： DNA损伤关键蛋白Mre11抗体 0.2ml | Rhesus antibody Rh IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的小鼠抗人IgM 规格 0.1ml |
| CARTPT Others Human 人 CART / CARTPT 人细胞裂解液 (阳性对照) | Anti-SCG3/SgIII /FITC 荧光素标记分泌粒蛋白Ⅲ抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml |
| A3细胞，淋巴细胞白血病细胞 5-8转基因鼻咽癌细胞系,F2-2细胞 CL-0330COLO 320DM(人结直肠腺癌细胞)5×106cells/瓶×2 | TrxR(Human thioredoxin reductase) ELISA Kit 人硫氧还蛋白还原酶Multi-class antibodies规格： 48T |
| CNE-2 低分化鼻咽癌细胞 | LRRFIP2： LRRFIP2蛋白抗体 0.2ml |
| IgM/PE-Cy7 PE-Cy7标记的兔抗人IgM 0.1ml | Anti-Axin1 轴蛋白1抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml |
| BDNF： 脑源神经营养因子抗体 0.1ml | SHG44细胞，胶质瘤细胞 人SV-40转化肺成纤维细胞,WI-38AV13细胞 膀胱成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml) |
| Rhesus antibody Rh CDCA1/Nuf2 细胞分裂周期相关蛋白1抗体 规格 0.2ml | Sars结构蛋白表达株;293sars181A |
| Human Factor VIII -related Antigen,F VIII Ag ELISA Kit 人第八因子相关抗原 96T | CXCL2 Protein Mouse 重组小鼠 CXCL2 / GRO2 / MIP-2 蛋白 (His & SUMO 标签) |
| Anti-Melamine/Gold 金标记抗三聚胺抗体IgG(10及15nm)Multi-class antibodies规格： 0.2ml | V79-4细胞，中国仓鼠肺细胞 人直肠腺癌细胞系,HRC-99细胞 CM-R077大鼠血管外膜成纤维细胞完全培养基100mL |
| prox1： prox-1抗体 0.1ml | 二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞;CHO/dhFr- |
| Anti-CD34/PE 荧光素PE标记CD34抗体(细胞表面的唾液粘蛋白)IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | 七星库道虫探针法荧光定量PCR试剂盒中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1 |
| HHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P) 人类疱疹病毒8抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg | 恒河猴细胞 英文名称： LLC-MK2 |
| ADP核糖基化因子相互作用蛋白1抗体 Anti-Arfaptin 1 0.1ml | 非洲绿猴肾细胞;CV-1 |
【注意事项】
1．PCR 操作各阶段应严格分区操作，避免交叉污染。
2．试剂盒各组分使用前应充分融化混匀，离心数秒后使用。
3．各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4．待测标本若不及时检测，应保存于-20℃或-70℃。
5．样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6．PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7．本试剂盒仅用于科研使用，不做为临床诊断使用。
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文献和实验相关专题 实验室很多同学都要做Real time PCR实验，实验室的师兄师姐都会有很多宝贵意见，不过也有实验室前没有做过的，查找了下资料和大家分享下关于实时荧光 Taqman 探针设计、实时荧光PCR探针的选择、引物的设计及评价。 荧光探针法是用序列特异的荧光标记探针来检测产物，探针法的出现使得定量PCR技术的特异性比常规PCR技术大大提高。目前较常提及的有TaqMan探针、FRET杂交 探针(荧光共振能量传递探针)和分子
所特有的，下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率，把引物二聚体调整到越小越好；探针法则需要设计荧光探针，这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个：完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上；这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置，根据自己试验情况而定，本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
一、荧光素酶报告基因的检测原理荧光素酶（Luciferase）是生物体内催化荧光素(luciferin)或脂肪醛(firefly aldehyde)氧化发光的一类酶的总称，来自于自然界能够发光的生物。自然界存在的荧光素酶来自萤火虫、发光细菌、发光海星、发光节虫、发光鱼、发光甲虫等。细菌荧光素酶对热敏感，因此在哺乳细胞的应用中受到限制。目前，以北美萤火虫虫(Photinus pyralis)来源的荧光素酶基因应用的最为广泛，该基因可编码550个氨基酸的荧光素酶蛋白，是一个61kDa的单体酶，无需
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