- ￥4490
- 联祖
- LZ-P3552
- 国产
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
36
- 英文名：
Fasciola gigantica
- 保质期：
保存期限为12个月
- 供应商：
上海联祖
- 保存条件：
-20℃保存
- 规格：
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 大片吸虫探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P3552 |
【检验原理】
本试剂盒即开即用，用户只需要提供样品DNA模板，引物和探针经过优化，灵敏性高，提供阳性对照，便于区分假阴性样品，特异性高，引物是根据指标DNA高度保守区设计，不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应，既可用于定性检测，又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级，本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】
【使用方法】
试剂准备（试剂准备区）
稀释标准曲线样品（以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例）。
由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2，1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液，最好用带芯枪头，下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头，在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理（样本处理区）
2.1如果有N个样品，最好设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取：核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂，操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应（20μL体系，在样品制备室进行）
3.1如果做定量分析并且只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复，则标记N+4个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），1个用于PCR阳性对照（直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板）。
| Anti-PAX8/FITC 荧光素标记配对盒基因8抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | ACV-A(Human Activin A) ELISA Kit 人活化素A 96T |
| Human Pancreastatin ELISA Kit 人胰抑制素Multi-class antibodies规格： 48T | Rhesus antibody Rh SMARCD3 肌动蛋白依赖染色质调控因子SMARCD3蛋白抗体 规格 0.2ml |
| Matriptase 2： 膜型丝酸蛋白酶2抗体 0.2ml | Rhesus antibody Rh IgG(3D3)/PE-Cy3 PE-Cy3标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 规格 0.1ml |
| EPHB1 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphB1 / EPHT2 人细胞裂解液 (阳性对照) | Shiga-like toxin IIe variant subunit A/FITC 荧光素标记抗猪水肿病大肠杆菌志贺样毒素Ⅱ型突变体(O139菌株)抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml |
| HUVE-12/CRL2480细胞，人脐静脉内皮细胞 长臂猿淋巴瘤,MLA-144细胞 人真皮淋巴内皮细胞总RNAHDLEC NA | PGM(Human Phosphoglucomutase) ELISA Kit 人0酸葡萄糖变位酶Multi-class antibodies规格： 48T |
| HAN 人羊膜细胞 | Lamin B2： 核纤层蛋白B2抗体 0.2ml |
| IgM/PE-Cy7 PE-Cy7标记的兔抗羊IgM 0.1ml | Anti-Phospho-Bcl-2 (Thr56) 0酸化Bcl-2抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml |
| B MyB： 转录因子MYB相关蛋白B抗体 0.2ml | 绵羊肺细胞;OAR-L1 胚胎成纤维细胞，NIH/3T3细胞 NCTC1469细胞，小鼠正常肝细胞 |
| Rhesus antibody Rh CD94/KLRD1 NK细胞表面抑制性受体CD94抗体 规格 0.2ml | 间充质干细胞软骨细胞分化生长添加物MCDS |
| Human soluble fibrin monomer complex,SFMC ELISA Kit 人可溶性血纤蛋白单体复合物 96T | 4T1(小鼠癌细胞) 5×106cells/瓶×2 |
| Anti-Phospho-Histone H3 (Thr11)/FITC 荧光素标记0酸化组蛋白3抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | SW620人结肠癌细胞 SW620 human colon cancer cells L-15+10%FBS |
| PGF2 alpha： 前列腺素F2a/PGF2 α抗体 0.2ml | 非洲绿猴肾细胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2 |
| Anti-CD57/FITC 荧光素标记抗CD57抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | 大片吸虫探针法荧光定量PCR试剂盒T/G细胞，人血管平滑肌细胞 KM小鼠网织细胞肉瘤瘤株,LⅡ细胞 人真皮成纤维细胞-胎儿裂解物HDF-f L |
| HSTF2/HSF2 peptide 热休克转录因子2抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg | 人内膜腺癌细胞 英文名称： HEC-1-B |
| 整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-12抗体 Anti-ADAM-TS12 0.1ml | FAM3C Protein Human 重组人 FAM3C / ILEI 蛋白 (Fc 标签) |
【注意事项】
1．PCR 操作各阶段应严格分区操作，避免交叉污染。
2．试剂盒各组分使用前应充分融化混匀，离心数秒后使用。
3．各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4．待测标本若不及时检测，应保存于-20℃或-70℃。
5．样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6．PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7．本试剂盒仅用于科研使用，不做为临床诊断使用。
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文献和实验如何获得高质量、高可信度的荧光定量PCR结果--高质量cDNA标准
跨内含子设计引物的方法来避免基因组DNA及假基因（Pseudogenes）的影响。如分别在相邻的两个外显子上设计qPCR引物，这样基因组DNA的扩增片段与cDNA扩增片段相比就增加了一个较大的内含子，而荧光定量PCR的延伸时间很短，很难扩增出大片段，如果使用SYBR Green方式检测，一旦有来源于基因组的扩增片段出现也可以在分析溶解曲线时发现。而对于原核生物，必须经过DNase I消化去除基因组DNA；但是，很多实验者发现，跨内含子设计引物有时的实验结果不佳，原因可能是基因组DNA增加了模板的复杂
相关专题 实验室很多同学都要做Real time PCR实验，实验室的师兄师姐都会有很多宝贵意见，不过也有实验室前没有做过的，查找了下资料和大家分享下关于实时荧光 Taqman 探针设计、实时荧光PCR探针的选择、引物的设计及评价。 荧光探针法是用序列特异的荧光标记探针来检测产物，探针法的出现使得定量PCR技术的特异性比常规PCR技术大大提高。目前较常提及的有TaqMan探针、FRET杂交 探针(荧光共振能量传递探针)和分子
所特有的，下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率，把引物二聚体调整到越小越好；探针法则需要设计荧光探针，这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个：完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上；这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置，根据自己试验情况而定，本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
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