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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-80°C (dry ice)
- 保质期:
At least 6 months at -80°C. Avoid freeze/thaw cycles. Protein may be diluted to ? 100 µg/ml in PBS + glycerol and stored at -80°C.
- 英文名:
PRMT9, FLAG-Tag, His-Tag Recombinant
- 库存:
1
- 供应商:
BPS Bioscience Inc.
- 规格:
20 µg
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文献和实验2. Yanzhong, Y., et al., Nature. 2014 Jun; 6: 267-273.
质,小分子或是金属。当融合有亲和标签的蛋白通过标签-配体作用结合再层析基质上时,通过洗杂步骤,即可去除掉其他的细胞成分。 为了洗脱所需要的蛋白质,通过改变缓冲液的条件,如pH,或通过竞争亲和标签和配体连接的方法来进行。 但怎样的纯化是较为成功的呢?仅达到所需的质量量级,如毫克级(或克级)即可满足吗? 这些并不简单。质在蛋白纯化中同样尤为重要,比如,就蛋白的生物活性和纯度而言,通常会有所要求。 以下我们来讨论并且比较2种技术: His-tag系统和Strep-tag®系统,都使用了亲和层析法来纯化
科技公司,而Nextal是一家研究蛋白质晶体学的公司,他们拥有一套体系可以简化制备用于蛋白质晶体成像的蛋白的过程。它的加入为Qiagen在蛋白质研究这一块注入了新鲜的血液。用基因工程的手段表达蛋白质,必需经过纯化才能实现最终目的。不同性质的蛋白质纯化条件各不相同太难摸索,这一点和核酸相差甚远,所以将目的蛋白和一个亲和纯化标签融合表达,通过亲和纯化Tag蛋白来纯化目的蛋白,就成为常用的迂回手段。大的Tag最后要经过切割得到目的蛋白,而His-Tag,这个只有6个组氨酸大小的标签在pH8.0时不带电,很小,几乎没有
Strep-tag®:适用范围广 纯化选择多 由于 His-tag 系统使用 Ni 离子,所以在纯化金属蛋白(多数为酶)时,可能会受到金属间交互作用的干扰,而使用 Strep-tag® 则不会出现此问题,因 Strep-Tactin® XT 与 Strep-tag® 的特异性结合不受金属离子影响。且因其温和的纯化流程,所以还能用于纯化大型蛋白、多亚基的蛋白复合体或是跨膜蛋白,并且保持蛋白功能。以 Strep-tag® 系统纯化出不同的蛋白,下图为例: 图 1 依据研究项目的不同,各实验室使用
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