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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
54
- 英文名:
Epizootic Hematopoietic Necrosis Virus(EHNV)
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 流行性造血器官坏死病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P3531 |
【检验原理】
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品DNA模板,引物和探针经过优化,灵敏性高,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标DNA高度保守区设计,不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应,既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级,本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】
【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有N个样品,最好设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取:核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应(20μL体系,在样品制备室进行)
3.1如果做定量分析并且只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复,则标记N+4个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),1个用于PCR阳性对照(直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板)。
| Rhesus antibody Rh BBS5 巴德-毕德氏综合征蛋白BBS5抗体 规格 0.2ml | AP12 ELISA Kit 大鼠apelin 12Multi-class antibodies规格: 48T |
| irGH(Human Immunoreactive growth hormone) ELISA Kit 人免疫反应性生长激素 96T | HIP1: 亨廷顿(舞蹈症)相互作用蛋白1抗体 0.2ml |
| AMPK alpha 2: 腺苷单0酸活化蛋白激酶α2抗体 0.1ml | Anti-CXCR5/CD185 细胞表面趋化因子受体5抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
| 小鼠垂体瘤细胞(分泌促生长激素分泌激素);AtT-20 | Rhesus antibody Rh AMPK alpha 1/PRKAA1 腺苷单0酸活化蛋白激酶α1抗体 规格 0.1ml |
| 杂交瘤(B类);Z1510C6D10F4G6 | apo-A1(Mouse apoprotein) ELISA Kit 小鼠载脂蛋白A1 96T |
| SLC3A2 Others Human 人 CD98 / SLC3A2 人细胞裂解液 (阳性对照) | 氟甲喹单克隆抗体 小鼠单抗 5 |
| Anti-PGC-1 Alpha/FITC 荧光素标记过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活子1α抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Rhesus antibody Rh phgophs-ATG4C(Ser398) 0酸化自噬相关蛋白4C抗体 规格 0.1ml |
| NAIP: 神经细胞凋亡抑制蛋白抗体 0.2ml | CL-0371K7M2 wt(小鼠骨肉瘤成骨细胞)5×106cells/瓶×2 |
| Anti-HSP-20/FITC 荧光素标记热休克蛋白-20抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | SERPINC1 Others Human 人 SerpinC1 / SERPINC1 / AithrombinIII 人细胞裂解液 (阳性对照) |
| Ret MMP-9 大鼠血清金属基质蛋白酶-9Multi-class antibodies规格: 48T | CADM4 Others Mouse 小鼠 CADM4 / IGSF4C / TSLL2 人细胞裂解液 (阳性对照) |
| CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP) 瓜酸环肽 0.5mg | 人滑膜细胞RNAHS miRNA5 μg |
| Phospho-CHK2 (ser19): 0酸化细胞周期检测点激酶2抗体 0.1ml | A875细胞,人黑色素瘤细胞 阪崎肠杆菌 人红系白血病细胞;TF-1 |
| Rhesus antibody Rh DPPL1 0脂酸0酸酶HTPAP抗体 规格 0.2ml | 流行性造血器官坏死病毒探针法荧光定量PCR试剂盒脑动脉血管内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml) |
| 兔抗人IgG-F(ab)2 0.5ml 国产 | 人成巨核细胞白血病细胞 英文名称: Dami |
| DAPK1(Death associated protein kinase 1) 凋亡相关蛋白激酶1抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg | TSPAN7 Others Cynomolgus 食蟹猴 TALLA-1 / TSPAN7 人细胞裂解液 (阳性对照) |
【注意事项】
1.PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2.试剂盒各组分使用前应充分融化混匀,离心数秒后使用。
3.各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4.待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
5.样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6.PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7.本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
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文献和实验传染性皮下及造血组织坏死病毒(Infectious hypodermal and hematopoietic necrosis virus,IHHNV)属细小病毒科,病毒粒子直径约20纳米,单链DNA,该病毒感染外胚层组织,如鳃、表皮、前后肠上皮细胞、神经索和神经节,以及中胚层器官,如造血组织、触角腺、性腺、淋巴器官、结缔组织和横纹肌,在宿主细胞核内形成包涵体。对虾传染性皮下及造血组织坏死病,又名慢性矮小残缺综合征(runt-deformity syndrome,RDS),1981年在美国
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。目前被普遍使用的多种常规PCR方法如各种凝胶电泳PCR法,终点荧光定量法或PCR-ELISA法叫做终点PCR法。实时荧光定量PCR法最大的优点是克服了终点PCR法进入平台期或叫饱和期后定量的较大误差,实现DNA/RNA的精确定量。普通PCR技术发明于1983年,而实时荧光定量PCR技术发明于上世纪九十年代并于1996年生产出了世界上第一台实时荧光定量PCR仪,实时荧光定量PCR技术得以实现的技术要素主要有荧光定量PCR试剂盒和实时荧光定量PCR仪,我国荧光定量PCR试剂盒研发实力强大,生产厂家较多
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