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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
39
- 英文名:
Enteropathogenic E.coli(EPEC)
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 肠致病性大肠杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P3516 |
【检验原理】
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品DNA模板,引物和探针经过优化,灵敏性高,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标DNA高度保守区设计,不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应,既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级,本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】
【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有N个样品,最好设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取:核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应(20μL体系,在样品制备室进行)
3.1如果做定量分析并且只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复,则标记N+4个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),1个用于PCR阳性对照(直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板)。
| Anti-PCNA/FITC 荧光素标记增殖细胞核抗原抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | BDNF(Human Brain derived neurotrophic facor) ELISA Kit 人脑源性神经营养因子 96T |
| ADM(Human adrenomedullin) ELISA Kit 人肾上腺髓质素Multi-class antibodies规格: 48T | Rhesus antibody Rh SMAD9 SMAD家族9抗体 规格 0.2ml |
| MPP5: 棕榈酰化膜蛋白5抗体 0.2ml | Rhesus antibody Rh IgG(3D3)/Cy5.5 Cy5.5标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 规格 0.1ml |
| CHODL Others Rat 大鼠 CHODL / CHOndrolectin 人细胞裂解液 (阳性对照) | Anti-phospho-SHC (Tyr317)/FITC 荧光素标记0酸化SH2结构域转化蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| HCPEpiC细胞,人脉络丛上皮细胞 小鼠淋巴瘤细胞,Nb2-11细胞 人前脂肪细胞-皮下cDNAHPA-s cDNA | PK(Human pyruvate kinase) ELISA Kit 人酸激酶Multi-class antibodies规格: 48T |
| 原代滑膜皮细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装:1ml | LMX1b: 指甲髌骨综合征相关蛋白NPS1抗体 0.2ml |
| IgG/FITC FITC标记的驴抗羊IgG 0.3ml | Anti-Bcl-xL Bcl-xL蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
| BATF: B细胞转录激活因子抗体 0.1ml | 3T6-Swiss albino小鼠胚胎成纤维细胞 3T6-Swiss albino mouse embryo fibroblasts DMEM培养基+10%FBS |
| Rhesus antibody Rh CD83/HB15 CD83抗体 规格 0.2ml | 多聚赖氨酸 1 mg/mlPLL |
| pMHC(Human peptide major histocompatibility complex) ELISA Kit 人肽-主要组织相容性复合体复合物 96T | HEC-1-A(人子宫内膜腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 |
| Anti-HIV-1 ENV (gp160) antigen/FITC 荧光素标记艾滋病病毒-1包膜糖蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | 小鼠B淋巴细胞杂交瘤细胞;SH2 小鼠肠粘膜上皮细胞完全培养基 100mL |
| PDZD7: PDZ结构域PDZK7蛋白抗体 0.2ml | 非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS5B;Vero-HCV-NS5B |
| Anti-CD66a/Cea-1/CEACAM1/FITC 荧光素标记癌胚抗原相关细胞粘附分子1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | 肠致病性大肠杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒PC-12(高分化)大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(高分化) PC-12 (high differeiation) rat pheochromocytoma cells (high differeiation) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS |
| HtrA2/Omi peptide 丝氨酸蛋白酶/线粒体丝氨酸蛋白酶多肽抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg | 人肠转移细胞 英文名称: Ca Ski |
| CD14/内毒素受体抗体 Anti-CD14 0.1ml | NRG1 Protein Human 重组人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD, Fc 标签) |
【注意事项】
1.PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2.试剂盒各组分使用前应充分融化混匀,离心数秒后使用。
3.各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4.待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
5.样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6.PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7.本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
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如何获得高质量、高可信度的荧光定量PCR结果--高质量cDNA标准
过程,无RNA损失。这就需要裂解液即可迅速裂解细胞,高效的保护RNA,又不会影响高效反转录反应,且对于后续荧光定量PCR无抑制作用。FastLine细胞到cDNA快速制备试剂盒(KR105,TIANGEN),一站式完成从细胞到cDNA的快速制备,同时去除基因组DNA残留,整个操作流程仅需50 min,获得的cDNA不但可以直接进行荧光定量 PCR还可以和正常提取RNA后进行第一链反转录后得到的cDNA一样,冷冻保存供以后使用,是从少量细胞快速制备cDNA的最佳选择,并可实现高通量检测。 图
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