比氏肠微孢虫探针法荧光定量PCR试剂盒

公司产品仅供科研研究实验、不得用于临床！

产品名称	规格	货号
比氏肠微孢虫探针法荧光定量PCR试剂盒	50T	LZ-P3510

【检验原理】
本试剂盒即开即用，用户只需要提供样品DNA模板，引物和探针经过优化，灵敏性高，提供阳性对照，便于区分假阴性样品，特异性高，引物是根据指标DNA高度保守区设计，不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应，既可用于定性检测，又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级，本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】




【使用方法】
试剂准备（试剂准备区）
稀释标准曲线样品（以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例）。
由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2，1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液，最好用带芯枪头，下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头，在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理（样本处理区）
2.1如果有N个样品，最好设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取：核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂，操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应（20μL体系，在样品制备室进行）
3.1如果做定量分析并且只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复，则标记N+4个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），1个用于PCR阳性对照（直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板）。
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ADAMTS7 peptide/HRP 辣根过氧化物酶标记整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-7抗原 1mg	Phospho-NFKB1(Ser373)： 0酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体 0.1ml
CBLN3： 小脑肽3抗体 0.2ml	Anti-KLRF1/NKp80/FITC 荧光素标记细胞毒性受体NK-p80抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ECM1 细胞外基质蛋白1抗体 规格 0.1ml	CXCL16(Human CXC-chemokine ligand 16) ELISA Kit 人CXC趋化因子配体16Multi-class antibodies规格： 48T
团头鲂尾鳍细胞;WCF	IgG-Fc/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1ml
小鼠骨髓间充质干细胞(EGFP标记) Mouse	CYP11A1： 细胞色素P450 11A1抗体 0.1ml
人非小细胞肺腺癌细胞;NCI-H1975 大鼠视网膜微血管内皮细胞完全培养基 100mL	Rhesus antibody Rh DCUN1D4 DCUN1D4蛋白抗体 规格 0.2ml
Factor I heavy chain： 补体因子I重链抗体 0.2ml	HSP70 热休克蛋白70 浓缩液 0.1ml 进口分装
Anti-StAR/StARD1 促黄体激素诱导蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	家猫肾细胞;CATK1
Anti-CD34/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠、兔、、猪、犬CD34抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	RM-1小鼠前列腺癌细胞 RM-1 mouse prostate cancer cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
SOHLH2： 卵子结合生成碱性螺旋蛋白2抗体 0.2ml	SK-MES-1(人肺鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 Alpha 1 Aiypsin / SerpinA1a 人细胞裂解液 (阳性对照)
Rhesus antibody Rh IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的兔抗小鼠IgM 规格 0.1ml	人细胞;C-33A
Rhesus antibody Rh KDM5C/Jarid1C/SMCX 组蛋白去甲基化Jarid1C抗体 规格 0.2ml	OSM Others Human 人 Oncostatin M / OSM 人细胞裂解液 (阳性对照)
Fc GammaR I /CD64(Human Receptor I for the Fc region of immunoglobulin G,Fc GammaR I ) ELISA Kit 人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅰ 96T	比氏肠微孢虫探针法荧光定量PCR试剂盒HT-29, 人结肠癌细胞
DARPP32： 多巴胺、cAMP调节0蛋白抗体 0.2ml	人低分化前胃癌细胞   英文名称：   BGC-823
anti-RARRES1/TIG1/FITC 荧光素标记视黄酸受体应答蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	人肠平滑肌细胞(HISMC)( 5×105 ) RA, 大鼠星形胶质细胞 Rattus

【注意事项】
1．PCR 操作各阶段应严格分区操作，避免交叉污染。
2．试剂盒各组分使用前应充分融化混匀，离心数秒后使用。
3．各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4．待测标本若不及时检测，应保存于-20℃或-70℃。
5．样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6．PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7．本试剂盒仅用于科研使用，不做为临床诊断使用。   
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