- ￥4490
- 联祖
- LZ-P3486
- 国产
- 2025年07月07日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
49
- 英文名：
Ehrlichia canis
- 保质期：
保存期限为12个月
- 供应商：
上海联祖
- 保存条件：
-20℃保存
- 规格：
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 犬艾利希体（犬埃立克体）探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P3486 |
【检验原理】
本试剂盒即开即用，用户只需要提供样品DNA模板，引物和探针经过优化，灵敏性高，提供阳性对照，便于区分假阴性样品，特异性高，引物是根据指标DNA高度保守区设计，不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应，既可用于定性检测，又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级，本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】
【使用方法】
试剂准备（试剂准备区）
稀释标准曲线样品（以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例）。
由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2，1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液，最好用带芯枪头，下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头，在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理（样本处理区）
2.1如果有N个样品，最好设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取：核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂，操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应（20μL体系，在样品制备室进行）
3.1如果做定量分析并且只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复，则标记N+4个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），1个用于PCR阳性对照（直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板）。
| Muc2 peptide 粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗原 0.5mg | phospho-NF1(Ser2515)： 0酸化1型神经纤维瘤抗体 0.1ml |
| CT3： /抗原3抗体 0.2ml | Anti-KCNA5/FITC 荧光素标记通道混合相关蛋白亚型5抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml |
| Rhesus antibody Rh ECE1 内皮素转化酶1抗体 规格 0.1ml | Lptn/LTN/XCL1(Human lymphotactin) ELISA Kit 人淋巴细胞趋化因子Multi-class antibodies规格： 48T |
| 人前列腺上皮细胞完全培养基 100mL | IgG-Fc/APC APC标记的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1ml |
| 黑人Butt淋巴瘤细胞;RAJI | Complement C3： 补体C3a过敏毒素抗体 0.1ml |
| PANC-1人胰腺癌细胞 Human pancreatic cancer cell line PANC-1 DMEM+10% FBS | Rhesus antibody Rh DCTN1/Dynactin 1 动力蛋白激活蛋白1抗体 规格 0.1ml |
| FOXD1： 叉头蛋白D1抗体 0.2ml | HIF-1alpha 浓缩液 0.1ml 进口分装 |
| Anti-STAT2 信号转导和转录激活因子2抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml | 猫肾细胞;CRFK |
| Anti-CR1/CD35/FITC 荧光素标记Ⅰ型补体受体抗体(C3b/C4b受体抗体)IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | 293LVT人胚肾细胞--用于慢病毒包装 293LVT human embryonic kidney cells -- for leiviral packaging DMEM(GIBCO:11995)+10% FBS(GIBCO)+1%NEAA+200mM L-glutamine |
| SNX7： 分选连接蛋白7抗体 0.2ml | SCaBER(人膀胱鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 人细胞裂解液 (阳性对照) |
| Rhesus antibody Rh IgG-Fc/PE-Cy7 PE-Cy7标记的兔抗小鼠IgG-Fc 规格 0.1ml | MLF, 小鼠淋巴成纤维细胞 |
| Rhesus antibody Rh KDEL (ER Marker) 赖氨酸，天冬氨酸，谷氨酸，亮氨酸相关序列抗体 规格 0.2ml | GPR114 Others Human 人 GPR114 人细胞裂解液 (阳性对照) |
| CMV IgM 巨细胞病毒 IgM(捕获法二步法) | 犬艾利希体（犬埃立克体）探针法荧光定量PCR试剂盒人胚肾细胞;293 [HEK-293] |
| DRD1： 多巴胺受体D1抗体 0.1ml | TM4(正常小鼠Sertoli细胞) 5×106cells/瓶×2 |
| Anti-UCP-3/FITC 荧光素标记线粒体脱偶连蛋白3抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | CXCL16 Others Mouse 小鼠 CXCL16 / SRPSOX 人细胞裂解液 (阳性对照) |
【注意事项】
1．PCR 操作各阶段应严格分区操作，避免交叉污染。
2．试剂盒各组分使用前应充分融化混匀，离心数秒后使用。
3．各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4．待测标本若不及时检测，应保存于-20℃或-70℃。
5．样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6．PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7．本试剂盒仅用于科研使用，不做为临床诊断使用。
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文献和实验相关专题 实验室很多同学都要做Real time PCR实验，实验室的师兄师姐都会有很多宝贵意见，不过也有实验室前没有做过的，查找了下资料和大家分享下关于实时荧光 Taqman 探针设计、实时荧光PCR探针的选择、引物的设计及评价。 荧光探针法是用序列特异的荧光标记探针来检测产物，探针法的出现使得定量PCR技术的特异性比常规PCR技术大大提高。目前较常提及的有TaqMan探针、FRET杂交 探针(荧光共振能量传递探针)和分子
所特有的，下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率，把引物二聚体调整到越小越好；探针法则需要设计荧光探针，这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个：完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上；这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置，根据自己试验情况而定，本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
-150bp的产物长度。3. 标准曲线线性关系不佳 加样存在误差: 使得标准品不呈梯度。 标准品出现降解: 应避免标准品反复冻融，或重新制备并稀释标准品。 引物或探针不佳: 重新设计更好的引物和探针。 模板中存在抑制物，或模板浓度过高4. 负对照有信号 引物设计不够优化：应避免引物二聚体和发夹结构的出现。 引物浓度不佳：适当降低引物的浓度，并注意上下游引物的浓度配比。 镁离子浓度过高：适当降低镁离子浓度，或选择更合适的mix试剂盒。 模板有基因组的污染：RNA提取过程中避免基因
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