- ￥4490
- 联祖
- LZ-P3423
- 国产
- 2025年07月05日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
25
- 英文名：
Cooperia curticei
- 保质期：
保存期限为12个月
- 供应商：
上海联祖
- 保存条件：
-20℃保存
- 规格：
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 短古柏线虫探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P3423 |
原理是由一对引物介导，能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增，经过n个热循环扩增，扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0＜E＜1,扩增效率＝倍，使得检测扩增产物中的特定基因成为可能
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
包装规格及成分：
使用方法:
一、样品 RNA 的制备
1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意:可以选用本公司 的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆转录)反应合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系(20 μL 体系)
2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。
3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆转录酶(含 RI),
反应终体积为 20μL。
4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。
5. 70℃保温 10 分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用,丌需要纯化。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
公司正在出售的产品：
| Anti-HCMV UL23/HHV5 UL23/FITC 荧光素标记人巨细胞病毒UL23抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | AKR1D1： 醛固酮还原酶家族1成员D1抗体 0.2ml |
| Phospho-PRAS40 (Thr246)： 0酸化蛋白激酶AKT底物1抗体 0.1ml | Rhesus antibody Rh CCDC134 卷曲螺旋结构域蛋白134抗体 规格 0.2ml |
| Anti-CD4/PE 荧光素PE标记CD4抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | Park2(Human Panson disease 2 pan) ELISA Kit 人帕金森氏病2Pan 96T |
| GZMH Others Human 人 Granzyme H 人细胞裂解液 (阳性对照) | Anti-KiSS-1R/GPR54/GPCR54/FITC 荧光素标记G蛋白偶联受体54抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml |
| 心肌细胞 (HCMa) (1×106 ) | PIM1+PIM3： 丝酸/苏酸激酶蛋白PIM1+PIM3抗体 0.2ml |
| 小鼠胚胎成纤维细胞;3T6-Swiss albino | anti-CXCL10/IP-10 /FITC 荧光素标记CXCL10趋化因子10/干扰素诱导蛋白10抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml |
| Rhesus antibody Rh Phospho-Stathmin (Ser16) 0酸化原癌基因蛋白18抗体 规格 0.1ml | SIP1 peptide 运动神经元存活蛋白结合蛋白1抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg |
| Rhesus antibody Rh Goat Anti-human IgG/AP 碱性0酸酶(AP)标记的羊抗人IgG 规格 0.1ml | ALCAM Others Cynomolgus 食蟹猴 ALCAM / CD166 人细胞裂解液 (阳性对照) |
| PAR4 (protease-activated receptor 4) 蛋白酶活化受体4/前列腺细胞凋亡反应蛋白4抗原 0.5mg | CL-0066COLO 205(人结肠癌细胞)5×106cells/瓶×2 |
| CK15： 细胞角蛋白15抗体 0.1ml | VERO细胞衍生株;SVP |
| GYG1： 糖原蛋白1抗体 0.2ml | PARP1 Others Mouse 小鼠 PARP-1 / PARP 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
| Anti-单克隆抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml | YAC-1(小鼠淋巴瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 |
| NOS(Mouse nitric oxide synthase) ELISA Kit 小鼠合成酶Multi-class antibodies规格： 48T | 短古柏线虫探针法荧光定量PCR试剂盒CLEC12A Others Human 人 CLEC12A / CLL-1 / DCAL2 人细胞裂解液 (阳性对照) |
| Wnt16： 信号通路Wnt16抗体 0.2ml | NCI-H2087(人非小细胞肺腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 |
| Synaptopodin： 突触足蛋白抗体 0.1ml | L-O2 人正常胎肝细胞 |
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文献和实验上还连接有MGB (Minor Groove Binder)修饰基团，可以将探针的Tm值提高10°C左右。因此为了获得同样的Tm值，MGB探针可以比普通TaqMan探针设计得更短，既降低了合成成本，也使得探针设计的成功率大为提高——因为在模板的DNA碱基组成不理想的情况下，短的探针比长的更容易设计。实验证明，TaqMan MGB探针对于富含A/T的模板可以区分得更为理想。 Taqman探针法已经得到广泛使用，不过有人认为这种技术利用了Taq酶5`—3`外切酶活性，一般试剂厂家只给Taq
。 2、若 NTC 出现的扩增曲线是由引物二聚体造成的，其长度往往较短（一般引物二聚体的长度大约为 50 - 60bp）, 低于目的片段的长度（目的片段长度一般为 80 - 200bp），所以引物二聚体的 Tm 值小于目的片段的 Tm 值，引物二聚体形成的融解曲线的峰形与目的基因的峰形不重叠。 3. CT 值很大怎么办？ 造成 CT 值偏大的因素较多，主要分为以下两大类情况： （1）相同体系，前期实验 CT 值正常，本次实验，所有基因扩增 CT 值皆偏大。 这种情况下，需要排查 RNA 是否存在降解
如何获得高质量、高可信度的荧光定量PCR结果--高质量cDNA标准
跨内含子设计引物的方法来避免基因组DNA及假基因（Pseudogenes）的影响。如分别在相邻的两个外显子上设计qPCR引物，这样基因组DNA的扩增片段与cDNA扩增片段相比就增加了一个较大的内含子，而荧光定量PCR的延伸时间很短，很难扩增出大片段，如果使用SYBR Green方式检测，一旦有来源于基因组的扩增片段出现也可以在分析溶解曲线时发现。而对于原核生物，必须经过DNase I消化去除基因组DNA；但是，很多实验者发现，跨内含子设计引物有时的实验结果不佳，原因可能是基因组DNA增加了模板的复杂
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