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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
53
- 英文名:
Clostridium sordellii
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 索氏梭状芽孢杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P3412 |
【检验原理】
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品DNA模板,引物和探针经过优化,灵敏性高,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标DNA高度保守区设计,不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应,既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级,本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】
【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有N个样品,最好设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取:核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应(20μL体系,在样品制备室进行)
3.1如果做定量分析并且只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复,则标记N+4个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),1个用于PCR阳性对照(直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板)。
| Rhesus antibody Rh IgG/AP 碱性0酸酶(AP)标记的兔抗大鼠IgG 规格 0.1ml | Rhesus antibody Rh ATAD3A/B/C 三0酸腺苷酶家族蛋白3A抗体 规格 0.2ml | KLH/PE 荧光素PE标记血蓝蛋白 0.1ml |
| Rhesus antibody Rh KLK2 激肽释放酶2抗体 规格 0.1ml | EBv IgA(Human epstein-barr virus IgA) ELISA Kit 人EB病毒IgA 96T | C2orf18: 2号染色体开放阅读框18抗体 0.2ml |
| EPBV IgM 乙型脑炎病毒 IgM(间接法二步法) | ABHD3: 肺α/β水解酶蛋白3抗体 0.2ml | 人脐静脉内皮细胞总RNAHUVEC NA |
| 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞;PC-12 [PC12] | Rhesus antibody Rh phospho-CDKN1A/P21 (Thr145) 0酸化p21蛋白抗体 规格 0.1ml | CD3E Others Cynomolgus 食蟹猴 CD3e / CD3 epsilon 人细胞裂解液 (阳性对照) |
| Saos-2人成骨肉瘤细胞 Saos-2 human osteosarcoma cells McCOY's 5A+15%FBS | Estrogen Receptor alpha: 雌激素受体α抗体 0.1ml | RPMI-8226细胞,人多发性骨髓瘤细胞 单核细胞增生李斯特氏菌 SV40T转化人脐静脉内皮细胞;PUMC-HUVEC-T1 |
| MAPK14 Others Human 人 p38 alpha / MAPK14 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | Anti-Phospho-PRK1 (Thr774)/PRK2 (Thr816) 0酸化内分泌腺衍生血管内皮生长因子抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml | 人角膜细胞RNAHK miRNA5 μg |
| IgM/Gold 金标记兔抗豚鼠IgM (10nm/15nm)Multi-class antibodies规格: 2ml | Anti-CRP/Biotin 生物素化C-反应蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | IM-9(人外周血B淋巴细胞) 5×106cells/瓶×2 迟缓真杆菌/迟缓埃格特菌 |
| FGF-10(Rat fibroblast growth factor-10,FGF-10 )ELISA Kit 大鼠成纤维细胞生长因子10Multi-class antibodies规格: 48T | 索氏梭状芽孢杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒Phospho-Rb (Ser807 + Ser811): 0酸化视网膜母细胞瘤相关蛋白1抗体 0.1ml | 小鼠单核巨噬细胞;J774A.1 |
| IL-13Ra1: 白细胞介素-13受体a1抗体 0.1ml | Rhesus antibody Rh IgM/PE-Cy3 PE-Cy3标记的兔抗豚鼠IgM 规格 0.1ml | MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14) 5×106cells/瓶×2 |
| Anti-Phospho-EGFR(Tyr845) 0酸化表皮生长因子受体抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml | Rhesus antibody Rh IL-1 Beta/IL-1B 白介素1β抗体 IL-1β 规格 0.1ml | HEL人红白细胞白血病细胞 HEL human erythroleukemia cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS |
【注意事项】
1.PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2.试剂盒各组分使用前应充分融化混匀,离心数秒后使用。
3.各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4.待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
5.样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6.PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7.本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
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文献和实验人 难辨梭状芽孢杆菌毒素A 型抗原酶联免疫分析( ELISA ) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中难辨梭状芽孢杆菌毒素A 型抗原含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人难辨梭状芽孢杆菌毒素 A 型抗原水平。用纯化的人难辨梭状芽孢杆菌毒素 A 型抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入难辨梭状芽孢杆菌毒素
人 难辨梭状芽孢杆菌毒素B 型抗原酶联免疫分析( ELISA ) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中难辨梭状芽孢杆菌毒素B 型抗原含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人难辨梭状芽孢杆菌毒素 B 型抗原水平。用纯化的人难辨梭状芽孢杆菌毒素 B 型抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入难辨梭状芽孢杆菌毒素
所特有的,下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率,把引物二聚体调整到越小越好;探针法则需要设计荧光探针,这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个:完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上;这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置,根据自己试验情况而定,本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
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