卡氏枝孢霉探针法荧光定量PCR试剂盒

公司产品仅供科研研究实验、不得用于临床！

产品名称	规格	货号
卡氏枝孢霉探针法荧光定量PCR试剂盒	50T	LZ-P3396

【检验原理】
本试剂盒即开即用，用户只需要提供样品DNA模板，引物和探针经过优化，灵敏性高，提供阳性对照，便于区分假阴性样品，特异性高，引物是根据指标DNA高度保守区设计，不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应，既可用于定性检测，又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级，本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】




【使用方法】
试剂准备（试剂准备区）
稀释标准曲线样品（以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例）。
由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2，1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液，最好用带芯枪头，下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头，在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理（样本处理区）
2.1如果有N个样品，最好设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取：核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂，操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应（20μL体系，在样品制备室进行）
3.1如果做定量分析并且只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复，则标记N+4个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），1个用于PCR阳性对照（直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板）。
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Annexin Ⅲ peptide 膜粘连蛋白A3抗体 0.5mg	phospho-NFKB p65(Ser529)： 0酸化细胞核因子抗体 0.1ml
DENTT： 细胞分裂核仁蛋白1抗体 0.2ml	Anti- Beta-lactoglobulin/FITC 荧光素标记β-乳球蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh E3 ubiquitin ligase/RNF218 E3泛素连接酶抗体 规格 0.2ml	MIP-5(Human macrophage inflammatory protein 5) ELISA Kit 人巨噬细胞炎性蛋白5Multi-class antibodies规格： 48T
肝窦内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)	IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的兔抗人IgM 0.1ml
人胚肺成纤维细胞;CCC-HPF-1	Connexin-45： 间隙连接蛋白45抗体 0.1ml
HFTF细胞，人胚胎眼Tenon's囊成纤维细胞 迟缓真杆菌/迟缓埃格特菌 小耳猪肺细胞;SEP-L2	Rhesus antibody Rh DCAKD 脱0酸辅酶A结构域蛋白抗体 规格 0.2ml
FNIP2： 卵泡刺激素结合蛋白2抗体 0.2ml	ER 浓缩液 0.1ml 进口分装
Anti-streptomycin 链霉素抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	人胚肺成纤维细胞;MRC-5
Anti-CD45RO/FITC 荧光素标记CD45RO抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	HO-8910PM细胞，人高转移卵巢癌细胞 小鼠肉瘤细胞,S37细胞 肾实质细胞Many types of cells包装：5 ×105次方(1ml)
SOX17： 转录因子SOX17抗体 0.1ml	人胚肺成纤维细胞;IMR-90 人淋巴血管内皮细胞完全培养基 100mL
Rhesus antibody Rh IgG-Fc/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗小鼠IgG-Fc 规格 0.1ml	MiaPaCa-2, 人胰腺癌细胞
Rhesus antibody Rh KCNE1 离子通道蛋白家族成员1抗体 规格 0.2ml	FCGR3A Others Human 人 CD16a / FCGR3A 人细胞裂解液 (阳性对照)
Anti-TM 甲状腺微粒体抗体(TM抗体) 96T	卡氏枝孢霉探针法荧光定量PCR试剂盒HSC-T6, 大鼠肝星状细胞系
DLG5： 胎盘和前列腺相关蛋白DLG5抗体 0.1ml	HKC(人胚上皮细胞)   5×106cells/瓶×2
Anti-URGCP/URG4/FITC 荧光素标记乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗体C端IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	MDA-MB-468(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 脑静脉血管平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

【注意事项】
1．PCR 操作各阶段应严格分区操作，避免交叉污染。
2．试剂盒各组分使用前应充分融化混匀，离心数秒后使用。
3．各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4．待测标本若不及时检测，应保存于-20℃或-70℃。
5．样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6．PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7．本试剂盒仅用于科研使用，不做为临床诊断使用。   
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