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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
36
- 英文名:
Brachyspira spp.
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 短螺旋体通用探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P3317 |
【检验原理】
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品DNA模板,引物和探针经过优化,灵敏性高,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标DNA高度保守区设计,不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应,既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级,本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】
【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有N个样品,最好设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取:核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应(20μL体系,在样品制备室进行)
3.1如果做定量分析并且只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复,则标记N+4个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),1个用于PCR阳性对照(直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板)。
| Anti-PEDF /FITC 荧光素标记色素上皮源性因子抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | CD8(Rat Troponin T) ELISA Kit 小鼠CD8分子 96T |
| GHRP(Human Growth Hormone Releasing Peptide) ELISA Kit 人生长激素释放多肽Multi-class antibodies规格: 48T | Rhesus antibody Rh SLC39A6 SLC39A6抗体 规格 0.1ml |
| MMP-22: 基质金属蛋白酶22抗体 0.2ml | Rhesus antibody Rh IgG 小鼠抗豚鼠IgG 规格 1mg |
| CSNK2A1 Others Mouse 小鼠 CSNK2A1 / CK2A1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | Anti-SLT/SLT-IIe(O139) /FITC 荧光素标记抗猪水肿素(O139)抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| RAMOS(RA.1)细胞,人B淋巴细胞瘤细胞 小鼠癌细胞株,EMT-6细胞 人小梁网细胞裂解物HTMCL | PK(Human pancreatickininogenase) ELISA Kit 人胰激肽原酶Multi-class antibodies规格: 48T |
| JEC, 人子宫内膜腺癌细胞系 | LAG-3/CD223: 淋巴细胞活化基因-3抗体 0.1ml |
| IgG/HRP 辣根过氧化物酶标记的驴抗豚鼠IgG 0.1ml | Anti-BNP 脑素抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
| BZW1: 碱性亮酸拉链蛋白BZW1抗体 0.2ml | Bcap-37细胞,癌细胞 人肺巨细胞癌,PG细胞 细胞名称 |
| Rhesus antibody Rh CD54/ICAM-1 细胞间粘附分子-1抗体 规格 0.1ml | 小鼠肝窦内皮细胞完全培养基 100mL |
| PA(Human prealbumin) ELISA Kit 人前白蛋白 96T | 恒河猴肾细胞;RM-3 |
| Anti-Phospho-HSL (Ser660)/FITC 荧光素标记0酸化荷尔蒙敏感脂肪酶抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | BSC-1细胞,猴肾细胞系 CHRF(人巨核细胞白血病) 叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21 |
| PGLS: 0酸葡萄糖酸内酯酶抗体 0.2ml | 高背鲫鱼尾鳍细胞;GBJd |
| Anti-CD158a/KIR2DL1/FITC 荧光素标记NK细胞抑制性受体2DL1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | 短螺旋体通用探针法荧光定量PCR试剂盒Vero非洲绿猴肾细胞 Vero the African green monkey kidney cells MEM培养基(GIBCO)+10%FBS |
| IL-7(Interleukin-7) 白介素7抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg | BC-009(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 |
| 瘦素受体抗体 Anti-Leptin receptor 0.2ml | BC-022(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 |
【注意事项】
1.PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2.试剂盒各组分使用前应充分融化混匀,离心数秒后使用。
3.各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4.待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
5.样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6.PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7.本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
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文献和实验【公告】丁香通试用中心:10月免费试用装精选(10月18日有更新)
。 2. 鼠尾直接PCR试剂盒(常温裂解):一步法 PCR;处理鼠尾样本无需加热;用于高通量鉴定、筛选。 3. 通用植物直接PCR试剂盒:无需进行 DNA 纯化;高效特异性扩增样品;用于多种植物叶片的处理。 4.EDTA抗凝血直接PCR试剂盒:无需预处理血液;世界上血液耐受能力最强的 PCR 反应体系;安全可靠。 5.植物总RNA提取试剂盒:整套试剂盒RNase-Free;RNA得率高;质量高;安全快速。 有奖免费试用: RIPA裂解液(中) 火晶梯度PCR仪 康宁SORENSON
上还连接有MGB (Minor Groove Binder)修饰基团,可以将探针的Tm值提高10°C左右。因此为了获得同样的Tm值,MGB探针可以比普通TaqMan探针设计得更短,既降低了合成成本,也使得探针设计的成功率大为提高——因为在模板的DNA碱基组成不理想的情况下,短的探针比长的更容易设计。实验证明,TaqMan MGB探针对于富含A/T的模板可以区分得更为理想。 Taqman探针法已经得到广泛使用,不过有人认为这种技术利用了Taq酶5`—3`外切酶活性,一般试剂厂家只给Taq
-A尾巴的RNA分子加上一串A尾巴,然后用带有一段通用序列(universal tag)的Oligo-dT及RT酶来合成cDNA。这样设计的一个好处就是一次RT反应合成了所有miRNA分子以及其他小RNA、mRNA对应的cDNA,接下来想用来检测什么都可以,细细算来省了不少特异引物和多次RT反应的钱呢!整个RT反应操作也是非常简单,加入预先混好的酶,37℃孵育60min,95℃孵育5min即完成cDNA合成。 最后一步就是取出一点cDNA为扩增模板,加入正反引物和real-time PCR 试剂盒
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