回归热疏螺旋体（回归热包柔螺旋体）探针法荧光定量PCR试剂盒

公司产品仅供科研研究实验、不得用于临床！

产品名称	规格	货号
回归热疏螺旋体（回归热包柔螺旋体）探针法荧光定量PCR试剂盒	50T	LZ-P3301

【检验原理】
本试剂盒即开即用，用户只需要提供样品DNA模板，引物和探针经过优化，灵敏性高，提供阳性对照，便于区分假阴性样品，特异性高，引物是根据指标DNA高度保守区设计，不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应，既可用于定性检测，又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级，本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】




【使用方法】
试剂准备（试剂准备区）
稀释标准曲线样品（以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例）。
由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2，1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液，最好用带芯枪头，下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头，在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理（样本处理区）
2.1如果有N个样品，最好设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取：核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂，操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应（20μL体系，在样品制备室进行）
3.1如果做定量分析并且只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复，则标记N+4个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），1个用于PCR阳性对照（直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板）。
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GNL1： 鸟嘌呤核苷酸结合蛋白1抗体 0.2ml	Rhesus antibody Rh Galactose kinase/GALK1 半乳糖激酶1抗体 规格 0.2ml
Anti-lamin A 核纤层蛋白A抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	GABABR2/GB2(GABA B Receptor 2) γ1基A型受体B2抗原 0.5mg
u-T3(Mouse Ultrasensitivity Tri-iodothyronine) ELISA KIT 小鼠高敏三碘甲状腺原氨酸Multi-class antibodies规格： 48T	phospho-CBL2 (Tyr674)： 0酸化原癌基因CBL2抗体 0.1ml
HEp-2细胞，人喉表皮样癌细胞 人脐静脉内皮细胞,HUVE-12/CRL2480细胞 叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21	GLYCTK： HBeAg结合蛋白4/甘油激酶抗体 0.2ml
MMP8 Others Human 人 MMP8 / CLG1 人细胞裂解液 (阳性对照)	Anti-Phospho-NPM (Ser4) 0酸化核仁0酸蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
Caco-2，人结直肠腺癌细胞	LH (Rabbit luteotropic hormone) ELISA Kit 兔子促黄体激素Multi-class antibodies规格： 96T
神经节肽抗体“甘丙肽” Anti-Galanin 0.2ml	TNF beta： 坏死因子β抗体(TNFβ) 0.1ml
PPAR- Gamma ELISA Kit 大鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体γ 96T	NCI-H596(人肺腺鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 cv-1(非洲绿猴肾细胞)
Rhesus antibody Rh T Beta 10 胸腺素β10抗体 规格 0.1ml	Calu-6(人肺退行性癌细胞) 5×106cells/瓶×2
Rhesus antibody Rh MYBPC1 肌球蛋白结合蛋白C抗体 规格 0.2ml	人葡萄膜黑色素细胞;UM
Anti-Pin1/FITC 荧光素标记肽基脯氨酞顺反异构酶Pinl抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK 人细胞裂解液 (阳性对照)
GPI(Human glycophosphatidylinositol) ELISA Kit 人糖0脂酰肌醇Multi-class antibodies规格： 48T	CL-0123IBRS-2(猪肾细胞)5×106cells/瓶×2
MEOX 2： 间充质同源盒蛋白2抗体 0.2ml	回归热疏螺旋体（回归热包柔螺旋体）探针法荧光定量PCR试剂盒hFOB 1.19(SV40转染人成骨细胞) 5×106cells/瓶×2 产气肠杆菌
Anti-AEG-1 AEG-1抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	U-2 OS(人骨肉瘤细胞)   5×106cells/瓶×2
Rhesus antibody Rh Phospho-NFKB p65(Ser468) 0酸化细胞核因子NF-κB p65抗体 规格 0.1ml	615小鼠T细胞性白血病瘤株;L7712

【注意事项】
1．PCR 操作各阶段应严格分区操作，避免交叉污染。
2．试剂盒各组分使用前应充分融化混匀，离心数秒后使用。
3．各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4．待测标本若不及时检测，应保存于-20℃或-70℃。
5．样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6．PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7．本试剂盒仅用于科研使用，不做为临床诊断使用。   
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