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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
54
- 英文名:
Babesia major
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 大巴贝虫探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P3256 |
原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
包装规格及成分:
使用方法:
一、样品 RNA 的制备
1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意:可以选用本公司 的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆转录)反应合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系(20 μL 体系)
2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。
3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆转录酶(含 RI),
反应终体积为 20μL。
4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。
5. 70℃保温 10 分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用,丌需要纯化。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
公司正在出售的产品:
| Anti-Oxytetracycline/FITC 荧光素标记土霉素抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | TIEG1 ELISA Kit 大鼠TGF-β诱导早期基因1 96T |
| ORP4: 氧化固醇结合蛋白4抗体 0.2ml | Rhesus antibody Rh SLC27A2/ACSVL1 长链脂肪酸辅酶A连接酶抗体 规格 0.2ml |
| Anti-Haase/FITC 荧光素标记透明质酸酶/玻璃酸酶抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Rhesus antibody Rh IgG/Cy7 Cy7标记的小鼠抗羊IgG 规格 0.1ml |
| MET Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 人细胞裂解液 (阳性对照) | Anti-Phospho-Smad2 (Ser245/250/255)/FITC 荧光素标记0酸化细胞信号转导分子SMAD2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| BJ细胞,人皮肤成纤维细胞系 克柔念珠菌 小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B2 | DNase- I (Human deoxyribonuclease I ) ELISA Kit 人脱氧核糖核酸酶ⅠMulti-class antibodies规格: 48T |
| CM-M009小鼠肺大静脉平滑肌细胞完全培养基100mL | LRRC6: 富含亮酸重复蛋白6抗体 0.1ml |
| IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555标记的驴抗兔IgG 0.1ml | Anti-phospho-B-Raf (Ser601) 0酸化B-Raf抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
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| Rhesus antibody Rh CD45RO CD45RO抗体 规格 0.1ml | 人食道平滑肌细胞裂解物HESMCL |
| HbCO(Human carboxyhemoglobin) ELISA Kit 人血红蛋白 96T | 小鼠骨髓瘤细胞;P3/NSI/1-Ag4-1 |
| Anti-HSP-90 Alpha/FITC 荧光素标记热休克蛋白90α抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | rCSC, 大鼠心肌细胞 [CIP 104328;IAM 13570;ICMP 5794;NCPPB 2991]细胞 HBL-100(整合SV40 基因的上皮细胞) |
| phospho-PIK3 gamma (Ser1101): 0酸化0脂酰肌醇激酶PIK3-γ抗体 0.1ml | 骨骼肌细胞培养基SkMCM |
| Anti-CD161/NK1.1/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠CD161抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | 大巴贝虫探针法荧光定量PCR试剂盒Jurk. Clone E6-1细胞,白血病细胞 急性T淋巴细胞白血病细胞,TALL-104细胞 人胰腺导管癌细胞;CFPAC-1 |
| Integrin alpha 1 整合素α1抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg | P3X63Ag8(小鼠骨髓瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 |
| 激素受体相关蛋白16抗体 Anti-TRA16 0.2ml | Calu-3(人肺腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 |
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文献和实验相关专题 实验室很多同学都要做Real time PCR实验,实验室的师兄师姐都会有很多宝贵意见,不过也有实验室前没有做过的,查找了下资料和大家分享下关于实时荧光 Taqman 探针设计、实时荧光PCR探针的选择、引物的设计及评价。 荧光探针法是用序列特异的荧光标记探针来检测产物,探针法的出现使得定量PCR技术的特异性比常规PCR技术大大提高。目前较常提及的有TaqMan探针、FRET杂交 探针(荧光共振能量传递探针)和分子
所特有的,下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率,把引物二聚体调整到越小越好;探针法则需要设计荧光探针,这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个:完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上;这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置,根据自己试验情况而定,本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
一、荧光素酶报告基因的检测原理荧光素酶(Luciferase)是生物体内催化荧光素(luciferin)或脂肪醛(firefly aldehyde)氧化发光的一类酶的总称,来自于自然界能够发光的生物。自然界存在的荧光素酶来自萤火虫、发光细菌、发光海星、发光节虫、发光鱼、发光甲虫等。细菌荧光素酶对热敏感,因此在哺乳细胞的应用中受到限制。目前,以北美萤火虫虫(Photinus pyralis)来源的荧光素酶基因应用的最为广泛,该基因可编码550个氨基酸的荧光素酶蛋白,是一个61kDa的单体酶,无需
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