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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
40
- 英文名:
Avian Herpesvirus 1(Gallid Herpesvirus-1、GaHV-1)1
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 1(RT-1、RT-1)禽疱疹病毒1型探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P3242 |
原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
包装规格及成分:
使用方法:
一、样品 RNA 的制备
1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意:可以选用本公司 的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆转录)反应合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系(20 μL 体系)
2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。
3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆转录酶(含 RI),
反应终体积为 20μL。
4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。
5. 70℃保温 10 分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用,丌需要纯化。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
公司正在出售的产品:
| Phospho-FLT3 (Tyr589 + Tyr591): 0酸化FMS样酪酸激酶3 0.1ml | phospho-ABCA1 (Ser2054): 0酸化腺苷三0酸结合盒转运体A1抗体 0.1ml |
| Anti-SHC SH2结构域转化蛋白1抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml | Rhesus antibody Rh CATSPER 阳离子通道相关蛋白1抗体 规格 0.2ml |
| Anti-Cystatin 3/CST3/FITC 荧光素标记胱抑素C/半胱氨酸蛋白酶抑制剂C抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | MHC(Human myosin heavy chain) ELISA Kit 人肌球蛋白重链 96T |
| 人肠微血管内皮细胞(HIMEC)( 5×105 ) RSC, 大鼠雪旺细胞 Rattus | Anti-κOR/FITC 荧光素标记kappa型受体抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| AK4 Others Human 人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | phospho-PI 3 Kinase p110 delta (Tyr524): 0酸化0脂酰肌醇激酶催化亚单位D抗体 0.1ml |
| 小鼠纹状体神经元MN-s | Anti-Cygb/FITC 荧光素标记细胞球蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| Rhesus antibody Rh Phospho-Smad2(Thr220) 0酸化细胞信号转导分子SMAD2抗体 规格 0.1ml | phospho-STAT1(p-Tyr701) peptide 0酸化信号转导与转录激活因子1抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg |
| Rhesus antibody Rh Goat Anti-Chicken IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的羊抗鸡IgG 规格 0.1ml | GPC5 Others Human 人 Glypican 5 / GPC5 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
| NR1/NMDAR1 谷酸受体1 0.5mg | CL-0127JEG-3(人绒毛膜癌细胞)5×106cells/瓶×2 |
| CHRNA9: 型乙酰胆碱受体α9/AChRα9抗体 0.2ml | 大鼠食管上皮细胞完全培养基 100mL |
| GLE1: 核孔蛋白GLE1抗体 0.2ml | 19. 干细胞系统 |
| Anti-MCP-3/CCL7 单核细胞趋化蛋白3抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml | DU 145, 人前列腺癌细胞 |
| AQP-0(Mouse Aquaporin 0) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白0Multi-class antibodies规格: 48T | 1(RT-1、RT-1)禽疱疹病毒1型探针法荧光定量PCR试剂盒DPP4 Others Cynomolgus 食蟹猴 DPP4 / DPPIV / CD26 人细胞裂解液 (阳性对照) |
| VDAC3: 线粒体外膜孔蛋白3抗体(电压依赖阴离子通道蛋白3) 0.2ml | NAMALWA(人Butt's淋巴瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 |
| Streptavidin: 链酶亲和素抗体 0.1ml | 原代单核细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装:1ml |
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文献和实验如何获得高质量、高可信度的荧光定量PCR结果--高质量cDNA标准
过程,无RNA损失。这就需要裂解液即可迅速裂解细胞,高效的保护RNA,又不会影响高效反转录反应,且对于后续荧光定量PCR无抑制作用。FastLine细胞到cDNA快速制备试剂盒(KR105,TIANGEN),一站式完成从细胞到cDNA的快速制备,同时去除基因组DNA残留,整个操作流程仅需50 min,获得的cDNA不但可以直接进行荧光定量 PCR还可以和正常提取RNA后进行第一链反转录后得到的cDNA一样,冷冻保存供以后使用,是从少量细胞快速制备cDNA的最佳选择,并可实现高通量检测。 图
所特有的,下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率,把引物二聚体调整到越小越好;探针法则需要设计荧光探针,这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个:完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上;这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置,根据自己试验情况而定,本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
,其中规定了确诊病例的诊断方法:具有急性发烧呼吸道疾病的临床症状并且经实时荧光定量PCR (real-time RT-PCR)或病毒分离培养 (viral culture)实验室检测方法检验证实感染A(H1N1)型猪流感病毒。卫生部办公厅于4月30日印发了《人感染猪流感预防控制技术指南(试行)》的通知》[7],其中在实验室检测和病例诊断报告章节,内容如下:检测程序呼吸道标本应首先应用real time RT-PCR方法检测A型流感病毒的M基因、Swine( H1N1)的HA基因和NP基因,以及质控对照
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