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- wksubio
- WS6011W
- 国内
- 2025年08月11日
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- 详细信息
- 询价记录
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
γ- Aminobutyric Acid (GABA) Content Kit
- CAS号：
WS6011W
- 保质期：
3个月
- 供应商：
上海瓦兰生物
- 保存条件：
4℃
- 规格：
96T
γ-氨基丁酸（GABA）含量试剂盒说明书
（货号：WS6011W 微板法 96 样）
一、产品简介：
4-氨基丁酸（GABA）广泛分布在动植物体中。在动物体内 GABA 几乎只存在于神经
组织中。在植物中如豆属、参属、中草药等的种子、根茎和组织液中都含有 G A B A，
且与植物的环境应激反应有关。
4-氨基丁酸（GABA）在碱性溶液中与次氯酸盐和苯酚反应生成蓝绿色物质，通过检
测该有色物质在 645nm 波长处的值，即可得出样本中 GABA 的含量。
二、试剂盒的组分与配制：
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体 100mL×1 瓶
4℃保存
试剂一
液体 4mL×1 瓶
4℃保存
试剂二
液体 2mL×1 支
4℃保存
临用前取出0.13mL试剂二至一支
新 EP 管中，再向其中加入 1.87mL
蒸馏水混匀做为试剂二使用（该
液体一周内用完）。
试剂三
液体 10mL×1 瓶
4℃保存
标准品
粉体 mg×1 支
4℃保存
若重新做标曲，则用到该试剂。
三、所需的仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、可调式移液枪、水浴锅、离心机、研钵、蒸馏水。
四、γ-氨基丁酸（GABA）含量测定：
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、样本制备：
① 组织样本：称取约 0.1g 组织样本加入研钵中，加入 1mL 提取液，在冰上进行匀浆，
12000rpm，4℃或室温离心 10min，取上清液待测。
【注】：若增加样本量，可按照组织质量（g）：提取液(mL)为 1：5~10 的比例进行提取。
② 细菌/细胞样本：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取约 500 万细菌或细
胞加入 1mL 提取液，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 200W，超声 3s，间隔 10s，
重复 30 次）；12000rpm 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（104）：提取液（mL）为 500~1000：1 的比例进行提取。
③ 液体样本：澄清的液体样本直接测定，若浑浊则离心后取上清检测。
2、上机检测：
① 酶标仪预热 30 min，调节波长到 645 nm。
② 所有试剂解冻至室温（25℃）。则试剂一和二可按照 30:200 的比例预先配制成混合液
（用多少配多少，现配现用），在 EP 管中依次加入：
试剂名称（μL）
测定管
空白管（仅做一次）
样本
50
蒸馏水
50
混合液
230
230
试剂三
100
100
混匀，沸水浴（95-100℃）10min，冰浴至室温，若浑浊需2
12000rpm 离心 5min，取澄清的 200μL 至 96 孔板中，于
645nm 处读取各管的 A 值。△A=A 测定-A 空白。
【注】1.若测定管的 A 值大于 1，则需将样本进行稀释（用蒸馏水稀释），稀释倍数 D 需代入计
算公式重新计算。
2.若△A 值低于 0.01，则可增加样本取样量 W（如增至 0.2g）或增加样本加样量 V1（如
由 50μL 增至 100μL，则混合液和试剂三均各自减少 25μL），则 W 和 V1 代入计算公式重
新计算。
五、结果计算：
1、标准曲线：y = 0.0576x - 0.0236，x 为标准品质量(μg)，y 为吸光值ΔA。
2、按样本质量计算：
GABA 含量(μg/g 重量)=[(ΔA+0.0236)÷0.0576]÷(W×V1÷V)×D
=347.2×(ΔA+0.0236)÷W×D
3、按细胞数量计算：
GABA 含量(μg/104 cell)=[(ΔA+0.0236)÷0.0576]÷(500×V1÷V)×D
=0.7×(ΔA+0.0236)×D
4、液体中 GABA 含量计算：
GABA 含量(μg/mL)=[(ΔA+0.0236)÷0.0576]÷V1×D=347.2×(ΔA+0.0236)×D
V---提取液体积，1mL；
V1---样本加入体积，0.05mL；
D---稀释倍数，未稀释即为 1；
W---样本取样质量，g；
500---细胞数量，万。
附：标准曲线制作过程：
1
标准品母液（5mg/mL）：标准品临用前甩几下使粉体落入底部，再加 2mL 蒸馏水溶解（两天内用
完）。
2
把母液用蒸馏水稀释成以下浓度梯度的标准品：0, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5 mg/mL。也可根据实际样本
来调整标准品浓度。
3
按照测定管的加样体系操作，根据结果即可制作标准曲线。
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