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文献和实验水浴箱。100ml具塞三角瓶、移液管、刻度吸管。 1.3 试剂及标准溶液 石油醚(经重蒸馏),硫酸(GR),无水硫酸钠(AR)。六六六[GBW(E)060081-060084]、滴滴涕[GBW(E)060102-060105]标准溶液:100μg/ml。临用时用石油醚稀释成混合应用液:六六六为1.6μg/ml(α-666、β-666、γ-666、δ-666均为0.4μg/ml),滴滴涕为4.0μg/ml(ρ,ρ’-DDE. o,ρ’-DDT、ρ,ρ’-DDD、 ρ,ρ’-DDT均为1.0μg
- - 1% 1% 1% 1% 1% 1% 1% 1% B27 - - - - - 0.5× 1× 1× 1× 1× N2 - - - - - 0.5× - - - - CHIR99021 - - 3 μM - - - - - - - Activin A - - 100 ng/ml 100 ng/ml 100 ng/ml
内的,而酶只有在甘油浓度 具体操作如下:在 1.5 mL 离心管中依次加入DNA(1 μg/μl)20 μg10× 酶切 buffer 4.0 μl限制性内切酶(10 U/μl)5.0 μl加 ddH2O 至 500 μl在最适温度下消化 1-3 hr。消化结束时可取 5 μl 电泳检测消化效果。如果消化效果不好,可以延长消化时间,但超过 6 hr 已没有必要。或者放大反应体积,或者补充酶再消化。如仍不能奏效,可能的原因是 DNA 样品中有太多的杂质,或酶的活力下降。消化后的 DNA 加入 1/10
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