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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Creatinine (Cr) Content Kit
- CAS号:
WS4021F
- 保质期:
3个月
- 供应商:
上海瓦兰生物
- 保存条件:
4℃
- 规格:
48T
本试剂盒仅供科研使用
肌酐(CRE)含量(肌氨酸氧化酶法)检测试剂盒说明书
(货号:WS4021F 分光法 48 样)
一、产品简介:
肌酐(Creatinine,CRE)是肌肉代谢的产物,主要通过肾小球滤过排出体外。在正常情况下,
体内肌酐的含量基本稳定。血液中的肌酐浓度可作为检测肾小球滤过功能的指标之一。
本试剂盒利用肌酐酶特异作用于肌酐生成肌酸,肌酸在肌酸酶和肌氨酸氧化酶的相继作用下
生成过氧化氢,过氧化氢与显色剂反应呈现紫色,该有色物质在546nm有最大吸收峰,进而计
算得到肌酐含量。
二、试剂盒组分与配制:
试剂名称
规格
保存要求
备注
试剂一
液体 17.5mL×1 瓶
4℃保存
试剂二
液体 6mL×1 瓶
4℃保存
标准管
粉体 2mg×1 支
4℃保存
用前甩几下使粉体落入底部,再加
1mL蒸馏水溶解即标准品浓度为
2mg/mL,再用蒸馏水稀释40倍
(1:39份水)成0.05mg/mL,即
442μmol/L的肌酐标准品待检液。
三、所需仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、可调式移液器、离心机、蒸馏水。
四、肌酐含量检测:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验样本
和试剂浪费!
1、样本制备:
① 组织样本:
取约 0.1g 组织样本,加 1mL 的提取液研磨,粗提液全部转移到 EP 管中,12000rpm,常温
离心 10min,上清液待测。
② 液体样品:澄清的液体可直接检测;若浑浊则离心后取上清液检测。
2、上机检测:
① 可见分光光度计预热 30min,设置温度在 37℃,设定波长到 546nm。
② 做实验前选取 2 个样本,找出适合本次检测样本的稀释倍数 D。
③ 所有试剂解冻至室温,在 1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)中依次加入:
试剂名称(μL)
测定管
空白管
(仅做一次)
标准管
(仅做一次)
样本
30
蒸馏水
200
230
200
标准品
30
试剂一
350
350
350
混匀,37℃孵育 5min,于 546nm 处读取吸光值 A1。
试剂二
120
120
120本试剂盒仅供科研使用
2
混匀,37℃孵育 5min 后于 546nm 处读取吸光值 A2,
△A=A2-A1。
【注】:1. 测定管的 A 大于 0.8,须用蒸馏水对样本进行稀释,稀释倍数 D 代入计算公式。
2. 若△A 的值小于 0.005,可增加样本加样体积 V1(如由 30μL 增至 60μL 或更多,则试蒸馏水相
应减少,空白管和标准管不变),或增加样本取样质量 W;则改变后的 V1 和 W 需代入公式重新
计算。
五、结果计算:
1、按照质量计算:
肌酐含量(nmol/g)=(C 标准×V2)×(△A 测定-△A 空白)÷(△A 标准-△A 空白)÷(V1÷V×W)×D
=442×(△A 测定-△A 空白)÷(△A 标准-△A 空白)÷W×D
2、按照体积计算:
肌酐含量(μmol/L)=(C 标准×V2)×(△A 测定-△A 空白)÷(△A 标准-△A 空白)÷V1×D
=442×(△A 测定-△A 空白)÷(△A 标准-△A 空白)×D
C 标准---肌酐标品,0.05mg/mL=442μmol/L=442nmol/mL;
V1---加入样本体积,0.03mL;
V2---加入标准品体积,0.03mL;
V---提取液体积,1mL;
Mr---肌酐分子量,113;
W---质量,g;
D---稀释倍数,未稀释即为 1。
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肌酐 (Cr) 含量试剂盒
¥150










