草鱼出血病I型病毒（GCRV I）RNA核酸检测试剂盒（恒温

公司产品仅供科研研究实验、不得用于临床！

产品名称	规格	货号
草鱼出血病I型病毒（GCRV I）RNA核酸检测试剂盒（恒温荧光法）	50T	LZ-P4446

【检验原理】
本试剂盒即开即用，用户只需要提供样品DNA模板，引物和探针经过优化，灵敏性高，提供阳性对照，便于区分假阴性样品，特异性高，引物是根据指标DNA高度保守区设计，不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应，既可用于定性检测，又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级，本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】




【使用方法】
试剂准备（试剂准备区）
稀释标准曲线样品（以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例）。
由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2，1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液，最好用带芯枪头，下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头，在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理（样本处理区）
2.1如果有N个样品，最好设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取：核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂，操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应（20μL体系，在样品制备室进行）
3.1如果做定量分析并且只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复，则标记N+4个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），1个用于PCR阳性对照（直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板）。

IgG/PE-CY5 PE-CY5标记的兔抗人IgG 0.1ml	IgG/FITC FITC标记的兔抗长爪沙鼠IgG 0.3ml	Rhesus antibody Rh WNT5A 信号通路Wnt5a抗体 规格 0.1ml
phospho-Bim (Ser55)： 0酸化细胞死亡调解子抗体 0.1ml	CMKLR1： 趋化样因子受体1抗体 0.1ml	Rhesus antibody Rh PCID1 PCID1蛋白抗体 规格 0.2ml
Rhesus antibody Rh CDK5RAP3 周期素依赖性激酶5激活结合蛋白C53抗体 规格 0.2ml	Rhesus antibody Rh Dog IgM/PE-Cy3 PE-Cy3标记的兔抗犬IgM抗体 规格 0.1ml	CM-H103胎儿真皮成纤维细胞完全培养基100mL
人肝细胞;QSG-7701 [QSG7701]	10×标本稀释液 12ml 进口分装	HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Egypt/2321-NAMRU3/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照)
Super Tube   狗细胞	ER-Alpha/ Beta Estrpgen Receptor Alpha/ Beta 雌激素受体(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg	20. 细胞系统
NBL1 Others Human 人 DAN 人细胞裂解液 (阳性对照)	AQP-3 ELISA Kit 大鼠水通道蛋白3Multi-class antibodies规格： 48T	人脑血管周细胞HBVP
Anti-PLAU/uPA/FITC 荧光素标记尿激酶型纤溶酶原激活因子抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	HGS： 肝细胞生长调节因子酪酸激酶底物抗体 0.2ml	大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞;PC-12 [PC12] T淋巴细胞白血病细胞，HuT78细胞 Mv.1.Lu(NBL-7)细胞，貂肺上皮细胞
NOSTRIN： 合酶转运诱导抗体 0.1ml	草鱼出血病I型病毒（GCRV I）RNA核酸检测试剂盒（恒温荧光法）Anti-GSK-3 Beta (NT) 糖原合酶激酶-3β抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	人表皮黑色素细胞-深色素RNAHEM-d miRNA5 μg
Anti-IL-14/Taxilin alpha/FITC 荧光素标记抗白介素14抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	Rhesus antibody Rh AEBP1 脂肪细胞增强结合蛋白1 规格 0.2ml	人胎盘羊膜细胞完全培养基   100mL
EGFR 小鼠表皮生长因子受体Multi-class antibodies规格： 48T	PAI-1 ELISA Kit 大鼠纤溶酶原激活物抑制因子1 96T	人脉络丛成纤维细胞裂解物HCPFL

【注意事项】
1．PCR 操作各阶段应严格分区操作，避免交叉污染。
2．试剂盒各组分使用前应充分融化混匀，离心数秒后使用。
3．各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4．待测标本若不及时检测，应保存于-20℃或-70℃。
5．样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6．PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7．本试剂盒仅用于科研使用，不做为临床诊断使用。