急性肝胰腺坏死病（AHPND/EMS）病原核酸检测试剂盒（恒

公司产品仅供科研研究实验、不得用于临床！

产品名称	规格	货号
急性肝胰腺坏死病（AHPND/EMS）病原核酸检测试剂盒（恒温荧光法）	50T	LZ-P4437

【检验原理】
本试剂盒即开即用，用户只需要提供样品DNA模板，引物和探针经过优化，灵敏性高，提供阳性对照，便于区分假阴性样品，特异性高，引物是根据指标DNA高度保守区设计，不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应，既可用于定性检测，又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级，本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】




【使用方法】
试剂准备（试剂准备区）
稀释标准曲线样品（以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例）。
由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2，1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液，最好用带芯枪头，下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头，在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理（样本处理区）
2.1如果有N个样品，最好设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取：核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂，操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应（20μL体系，在样品制备室进行）
3.1如果做定量分析并且只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复，则标记N+4个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），1个用于PCR阳性对照（直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板）。

Anti-PAX8/FITC 荧光素标记配对盒基因8抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	Anti-phospho-IKK gamma (Ser31) /FITC 荧光素标记0酸化核因子κB激酶gamma抑制剂抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	LAT： T细胞活化连接蛋白抗体 0.1ml
NPEPPS： 嘌呤霉素敏感性肽酶蛋白抗体 0.2ml	PLGLB2： 纤溶酶相关蛋白B2抗体 0.2ml	Anti-Phospho-Caspase-9 (Try153) 0酸化半胱氨酸蛋白酶9抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
Anti-HIRA/DGGR1/FITC 荧光素标记组蛋白替换精蛋白DGGR1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	Anti-CHK1/FITC 荧光素标记抗细胞周期检测点激酶1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	SW480-EGFP-puro [SW480-pSB4](慢病毒构建稳定株)人结肠腺癌细胞 SW480-EGFP-puro [SW480-pSB4] (leiviral consuct stable sain) of human colon adenocarcinoma cells 1640+10% FBS+2μg/ml puromycin
ADIPOQ Others Human 人 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 人细胞裂解液 (阳性对照)	MMP-9(matrix metalloproteinase 9) 基质金属蛋白酶-9抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg	人髓核细胞cDNAHNPC cDNA
COS-7   非洲绿猴SV40转化的细胞	蛋白酶活化受体4/前列腺细胞凋亡反应蛋白4抗体 Anti-PAR4 0.1ml	RN-c, 大鼠皮质神经元 Rattus
大鼠卵巢成纤维细胞完全培养基 100mL	CyPA(Mouse cyclophilin A) ELISA Kit 小鼠嗜环蛋白/亲环素A 96T	tTA基因修饰的小鼠胰腺癌细胞(B类);Pan02-CAG-tTA-3E6 木瓜蛋白酶(含100mL酶解缓冲液) 10mL
Goat Anti-Guinea IgG 羊抗豚鼠IgG 1mg	Rhesus antibody Rh SH2D1A/SAP 信号传导T淋巴细胞活化相关蛋白抗体 规格 0.2ml	角膜内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)
Annexin VI： 膜粘连蛋白6抗体 0.1ml	急性肝胰腺坏死病（AHPND/EMS）病原核酸检测试剂盒（恒温荧光法）Rhesus antibody Rh MMP-2 基质金属蛋白酶-2抗体 规格 0.1ml	QG-56细胞，人肺扁平上皮癌细胞 中国仓鼠仓鼠卵巢细胞亚株,CHO-K1细胞 CM-M010小鼠肺大动脉平滑肌细胞完全培养基100mL
Rhesus antibody Rh CD170/Siglec-5 唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素5抗体 规格 0.1ml	Anti-STK/CK II Alpha/FITC 荧光素标记属丝/苏氨酸蛋白质激酶抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	人直结肠平滑肌细胞完全培养基   100mL
HBF(Human anti-cytomegalovirus IgM antibody) ELISA Kit 人胎儿血红蛋白 96T	AMBP(Human alpha-1-microglobulin/bikunin precursor) ELISA Kit 人α1微球蛋白/bikunin前体Multi-class antibodies规格： 48T	SkMC Pellet 人骨骼肌细胞团块 > 1 mio.cells 人生发基质细胞cDNAHHGMC cDNA

【注意事项】
1．PCR 操作各阶段应严格分区操作，避免交叉污染。
2．试剂盒各组分使用前应充分融化混匀，离心数秒后使用。
3．各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4．待测标本若不及时检测，应保存于-20℃或-70℃。
5．样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6．PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7．本试剂盒仅用于科研使用，不做为临床诊断使用。