拟态弧菌核酸检测试剂盒（恒温荧光法）

公司产品仅供科研研究实验、不得用于临床！

产品名称	规格	货号
拟态弧菌核酸检测试剂盒（恒温荧光法）	50T	LZ-P4304

【检验原理】
本试剂盒即开即用，用户只需要提供样品DNA模板，引物和探针经过优化，灵敏性高，提供阳性对照，便于区分假阴性样品，特异性高，引物是根据指标DNA高度保守区设计，不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应，既可用于定性检测，又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级，本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】




【使用方法】
试剂准备（试剂准备区）
稀释标准曲线样品（以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例）。
由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2，1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液，最好用带芯枪头，下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头，在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理（样本处理区）
2.1如果有N个样品，最好设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取：核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂，操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应（20μL体系，在样品制备室进行）
3.1如果做定量分析并且只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复，则标记N+4个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），1个用于PCR阳性对照（直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板）。

IgG/FITC 荧光素标记小鼠抗大鼠IgGMulti-class antibodies规格： 0.3ml	Anti-pro-caspase3/FITC 荧光素标记半胱天冬酶-3酶原抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	Pisum sativum agglutinin,PSA ELISA Kit 豌豆凝集素Multi-class antibodies规格： 48T
Human Involucrin,iNV ELISA Kit 人套膜蛋白Multi-class antibodies规格： 48T	iFABP(Human intestinal fatty acid binding protein) ELISA Kit 人肠脂肪酸结合蛋白Multi-class antibodies规格： 48T	CD142： 组织因子抗体 0.1ml
IKBKE： 核因子κB抑制蛋白E抗体 0.1ml	LIFR： 白血病抑制因子受体抗体 0.1ml	EPHB6 Others Human 人 EphB6 / EPHB6 人细胞裂解液 (阳性对照)
5637人膀胱癌细胞 5637 human bladder cancer cells 1640+10% FBS	Anti-Annexin III 膜粘连蛋白A3抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	狗肾细胞隆突型;MDCK superdome
3T6   Swiss albion小鼠胚胎成纤维细胞	Rhesus antibody Rh phospho-NFATc2(Ser330) 0酸化核因子活化T细胞胞浆蛋白2抗体 规格 0.1ml	人神经束膜细胞总RNAHPC NA
IGFBP5 Protein Canine 重组狗 IGFBP5 / IGFBP-5 蛋白 (Fc 标签)	Rhesus antibody Rh FOXO1 叉头蛋白O1抗体 规格 0.1ml	TNFRSF10A Others Human 人 TNFRSF10A / CD261 / APO2 人细胞裂解液 (阳性对照)
荷尔蒙敏感脂肪酸抗体 Anti-HSL 0.2ml	DRD4 receptor peptide 多巴胺受体-D4抗原 0.5mg	EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY1002
CCSA-4(Human colon cancer-specific antigen-4) ELISA kit 人大肠癌专一抗原4 96T	拟态弧菌核酸检测试剂盒（恒温荧光法）CAPZA2： F肌动蛋白α2亚基抗体 0.1ml	CPB2 Others Human 人 CPB2 / Carboxypeptidase-B2 人细胞裂解液 (阳性对照)
Rhesus antibody Rh SSX5 滑膜肉瘤X断点蛋白5抗体 规格 0.2ml	GRIK1： 谷酸受体红藻酸离子1抗体 0.2ml	人肺成纤维细胞完全培养基   100mL
Rhesus antibody Rh MRF/C11orf9 髓鞘基因调控因子抗体 规格 0.2ml	Anti-P21/CDKN1A p21蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml	IgG2a Others Mouse 小鼠 IgG2a-Fc 人细胞裂解液 (阳性对照)

【注意事项】
1．PCR 操作各阶段应严格分区操作，避免交叉污染。
2．试剂盒各组分使用前应充分融化混匀，离心数秒后使用。
3．各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4．待测标本若不及时检测，应保存于-20℃或-70℃。
5．样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6．PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7．本试剂盒仅用于科研使用，不做为临床诊断使用。