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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
43
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 百日咳杆菌(BP)核酸检测试剂盒 | 50T | LZ-P2090 |
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品DNA模板,引物和探针经过优化,灵敏性高,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标DNA高度保守区设计,不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应,既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级,本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】
【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有N个样品,最好设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取:核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应(20μL体系,在样品制备室进行)
3.1如果做定量分析并且只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复,则标记N+4个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),1个用于PCR阳性对照(直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板)。
| NOG Protein Human 重组人 Noggin / NOG 蛋白 (His 标签) | Annexin A1: 膜粘连蛋白A1抗体 0.1ml |
| 小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B2 | Rhesus antibody Rh Calcineurin A/PP-2B alpha 1 钙调0酸酶抗体 规格 0.1ml |
| EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0901 人真皮淋巴上皮细胞完全培养基 100mL | PDH E1(Human pyruvate dehydrogenase-E1) ELISA Kit 人酸脱氢酶E1 96T |
| Promocell C-24110 Melanocyte Growth Medium KIT, 黑色素细胞生长培养基套装 500ml | Anti-LRP6/FITC 荧光素标记低密度脂蛋白受体相关蛋白6抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| REM 大鼠胚胎肌肉成纤维样细胞 | PAK1: p21激活激酶1抗体 0.1ml |
| 原代内皮细胞培养特制添加剂Many types of cells包装:5/2.5/1ml | Anti-DR5/APO-2L/TRAILR2/CD262/FITC 荧光素标记细胞调亡素/死亡受体5抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| Rhesus antibody Rh phospho-RACGAP1(Ser387) 0酸化Rho GTP酶激活蛋白GAP抗体 规格 0.1ml | CD20(抗原) CD20(抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg |
| Rhesus antibody Rh Glucagon 胰高血糖素抗体 规格 0.1ml | CST6 Others Mouse 小鼠 Cystatin E / CST6 人细胞裂解液 (阳性对照) |
| Klf4 (Kruppel likefactor 4) 肠道内富含的Kruppel样因子抗原 0.5mg | CL-0322Beta-TC-6(小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞)5×106cells/瓶×2 |
| C22orf25: 22号染色体开放阅读框25抗体 0.2ml | 水貂肺上皮细胞;Mv.1.Lu(NBL-7) |
| VP3 Goose parvovirus: 鹅细小病毒GPV抗体 0.2ml | PGA4 Others Human 人 PGA4 / Pepsinogen A 人细胞裂解液 (阳性对照) |
| Anti-Phospho-MSK1 (Ser360) 0酸化有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶1抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml | 水牛皮肤成纤维样细胞;WB-S4 |
| C1INH(Mouse Complement 1 inhibitor autoantibody) ELISA Kit 小鼠补体1抑制物抗体Multi-class antibodies规格: 48T | 百日咳杆菌(BP)核酸检测试剂盒CD40 Others Rat 大鼠 CD40 / TNFRSF5 人细胞裂解液 (阳性对照) |
| VEGF: 血管内皮生长因子抗体 0.1ml | CSC, 小鼠心肌细胞 |
| SOX14: 核转录因子SOX14抗体 0.2ml | HCAEC人冠状动脉内皮细胞 HCAEC in human coronary artery endothelial cells ECM(Sicencell Cat#1001) |
【注意事项】
1.PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2.试剂盒各组分使用前应充分融化混匀,离心数秒后使用。
3.各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4.待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
5.样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6.PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7.本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
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文献和实验离 0.1-25 kb 范围内的核酸分子。聚丙烯酰胺形成的孔径较小,可用于分离小于1 kb 的核酸分子。某些情况下,可采用聚丙烯酰胺凝胶以获得片段小于 100 bp 的单碱基分辨率[1]。 表 1. 琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶之间的差异 2. 准备标准品和样品 a .核酸标准品选择 当运行凝胶时,含有已知大小的核酸参照样品通常被称为标准品、标记或分子量标准,用于目的样品大小的估计。在为给定样品选择合适的分子量标准时,需考虑如下因素: Ladde 类型(例如 DNA 或 RNA),片段结构(例如单链或双链
纯化特定大小范围(例如,200-300bp)的 DNA 片段,以不仅去除低分子量和高分子量片段,而且还去除衔接子,酶 以及来自前面步骤的试剂。片段筛选有助于确保输入样品具有长度均一的片段,从而实现具有高品质和一致性的测序[1]。凝胶电泳是尺寸选择的一种方法,因为在窄范围(图 8 )中选择特定尺寸片段的效率高。 图 8.片段筛选前后的片段大小分布 b. 凝胶纯化概述 制备型电泳是从凝胶中分离和纯化核酸的关键步骤。核酸纯化通常先从凝胶基质上切割目标样品条带,然后再提取核酸。在进行凝胶纯化时,应注意
等都与核酸有关。70年代以来兴起的遗传工程,使人们可用人工方法改组DNA,从而有可能创造出新型的生物品种。如应用遗传工程方法已能使大肠杆菌产生胰岛素、干扰素等珍贵的生化药物。
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