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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
45
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 禽流感病毒H5N1亚型PCR检测试剂盒 | 50T | LZ-P1731 |
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品DNA模板,引物和探针经过优化,灵敏性高,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标DNA高度保守区设计,不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应,既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级,本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】
【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有N个样品,最好设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取:核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应(20μL体系,在样品制备室进行)
3.1如果做定量分析并且只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复,则标记N+4个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),1个用于PCR阳性对照(直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板)。
| 大鼠胚胎心肌细胞;H9c2(2-1) 胶质瘤细胞,SHG-44细胞 W6/32细胞,小鼠B细胞杂交瘤细胞 | PAI-1 ELISA Kit 大鼠纤溶酶原激活物抑制因子1Multi-class antibodies规格: 48T |
| EFNA1 Others Human 人 EFNA1 / Ephrin-A1 人细胞裂解液 (阳性对照) | HEATR8: HEAT重复内含蛋白8蛋白抗体 0.2ml |
| NRG1 Protein Human 重组人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD) | Anti-phospho-Histone H1 (Thr146) 0酸化组蛋白H1抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
| 人胚肺成纤维细胞;HFL1 | Rhesus antibody Rh Activated protein C/PROC1 活化蛋白C抗体 规格 0.1ml |
| 人肺癌紫杉醇耐药株 英文名称: A549/ Taxol | MYO/MB ELISA Kit 大鼠肌红蛋白 96T |
| NLGN3 Others Human 人 Neuroligin-3 / NLGN3 人细胞裂解液 (阳性对照) | Rhesus antibody Rh VCP 含缬酪肽蛋白抗体 规格 0.1ml |
| Anti-AFP/HRP 辣根过氧化物酶标记鼠抗人甲胎蛋白单克隆抗体(包被)IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Rhesus antibody Rh PAR6 缺陷性分配同源物α抗体 规格 0.2ml |
| NALP12: NALP12抗体 0.2ml | CM-R052大鼠子宫平滑肌细胞完全培养基100mL |
| Anti-IRS P53 /FITC 荧光素标记胰岛素受体底物p53蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | NCI-H716(人结直肠腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 MDA-MB-231(癌细胞) |
| IRF(Human interferon Regulatory Factor) ELISA Kit 人干扰素调节因子Multi-class antibodies规格: 48T | PARP3 Others Human 人 PARP-3 / PARP3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
| IgG/Cy3 Cy3标记的兔抗小鼠IgG 0.1ml | 人皮肤成纤维样细胞;HSF2 |
| Contactin-1: 神经细胞表面蛋白F3 0.2ml | RSC96细胞,大鼠雪旺细胞 人肝癌细胞,9204细胞 CL-0136L6(大鼠成肌细胞)5×106cells/瓶×2 |
| Rhesus antibody Rh Desmoglein 3/DSG3 桥粒芯蛋白3抗体 规格 0.1ml | 禽流感病毒H5N1亚型PCR检测试剂盒人肝窦内皮细胞cDNAHHSEC cDNA |
| P53 浓缩液 0.1ml 进口分装 | Bel-7402 人肝癌细胞 |
| C5 过敏毒素C5(补体C5)抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg | 人肝脏星形细胞cDNAHHSteC cDNA |
【注意事项】
1.PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2.试剂盒各组分使用前应充分融化混匀,离心数秒后使用。
3.各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4.待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
5.样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6.PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7.本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
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文献和实验性禽流感 。该试剂包括检测 H5 抗原的酶联免疫试剂盒、胶体金试剂盒以及检测 H5 抗体的酶联免疫试剂盒在内,已经发展成为系列诊断试剂,既有能检测抗原的,也能检测抗体的;既能用于检测禽类,也能用于检测人;有 ELISA 法,也有胶体金法,根据不同的检测目的分别进行了试剂细化,能够满足不同检测目的的需要。该试剂具有灵敏度高、特异性好的显著特点,能及时、高效的检测出 H5N1 亚型禽流感病毒抗原或抗体,可检测标本包括排泄物、口鼻腔分泌物、鸡胚培养的完整病毒或裂解病毒以及血清,最快在 30 分钟 , 最迟
实验室检测和快速诊断的标准如《GB/T 19438.1-2004禽流感病毒通用荧光RT-PCR检测方法》、《GB/T 19438.2-2004 H5亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法》、《GB/T 19438.3-2004 H7亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法》等。以上实时荧光定量PCR技术在禽流感检测方面的国家标准是该技术在当前的人感染猪流感诊断中应用的基础和前提。实时荧光定量PCR技术及在我国卫生应急中的应用要求实时荧光定量PCR技术(Real-time quantitative
、H3、H5、H7和H9等各亚型毒株,对野生型的人H5N1病毒则有更高的生产效率[15]。其工艺流程:复苏细胞库的Vero细胞,经方瓶和转瓶扩增种子细胞,接种至生物反应器中,经过反应器逐级放大至6000L反应器,控制细胞密度在2×106~3×106/mL,按一定的病毒感染复数(Multiplicity of infection,MOI)接种病毒,病毒吸附lh后加入胰酶,32~35℃孵育48~72 h后收获病毒液。 2.2 国内应用现状 国内禽流感疫苗或流感疫苗的生产工艺均采用鸡胚生产
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