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Strep-Tactin XT
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34
12个月
上海邦景
2-8℃
5ml
描述:
Strep-Tactin XT(Strep-Tactin 的升级产品)琼脂糖凝胶 FF 是一种将 Strep-Tactin XT 共价交联在琼脂糖凝胶微球上,形成的生物亲和层析分离介质。该纯化介质主要用于纯化 Strep tag II 或 Twin strep tag 标签蛋白。Strep tagII 标签为 8 个氨基酸的小标签(WSHPQFEK),由于标签小,仅为 1kDa 左右,一般不影响融合后蛋白质的结构和功能,常用于融合表达蛋白质的检测和纯化。由于 Strep-Tacin XT 对 Strep tag II 标签具有高度特异性,一步纯化就能获得高纯度的蛋白质样品。Strep tag II 标签蛋白与凝胶结合后可使用脱硫生物素竞争方式进行洗脱,该洗脱方式比较温和,对蛋白影响极小。由于 Strep-Tactin 对 Strep tag II 标签具有很强的吸附能力,在生物素的洗脱过程中不易完全洗脱,造成洗脱效率较低。可以通过在脱硫生物素洗脱液中添加 25mM NaOH 来提高蛋白回收效率,而添加 NaOH 后会造成 Strep-Tactin从填料上脱落,进而污染纯化蛋白。本产品为升级的 Strep-Tactin XT,其可耐受高浓度的 NaOH 洗脱(0.5M),除此外 Strep-Tactin XT 可耐受 1%SDS、6M 尿素,因此使用该填料可以在变性条件下纯化标签蛋白。储存:4~8℃可保存 2 年。保存液:10mM Tris-HCl,pH7.5;100mM NaCl;20%乙醇实验用溶液:(1) 结合缓冲液:根据自身蛋白性质来定,一般推荐 50mM Tris-HCl(pH8.0), 150mM NaCl(或采用 PBS)(2) 洗涤液与结合缓冲液相同,一般洗涤 5~20 个柱体积。(3) 洗脱缓冲液:在结合缓冲液中加入 2.5~3.5mM D-Biotin。或根据蛋白性质和用途灵活使用其它洗脱条件,如 2.5mMD-Biotin+10mM NaOH;25~50mM NaOH;0.2% SDS:(4) 柱再生:0.2M NaOH 洗涤 3~5 个柱体积;1M NaCl 洗涤 3~5 个柱体积;PBS 平衡 3~5 个柱体积。
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