王不留行染料法PCR鉴定试剂盒

公司产品仅供科研研究实验、不得用于临床！

产品名称	规格	货号
王不留行染料法PCR鉴定试剂盒	50T	LZ-P2529

【检验原理】
本试剂盒即开即用，用户只需要提供样品DNA模板，引物和探针经过优化，灵敏性高，提供阳性对照，便于区分假阴性样品，特异性高，引物是根据指标DNA高度保守区设计，不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应，既可用于定性检测，又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级，本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】




【使用方法】
试剂准备（试剂准备区）
稀释标准曲线样品（以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例）。
由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2，1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液，最好用带芯枪头，下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头，在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理（样本处理区）
2.1如果有N个样品，最好设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取：核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂，操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应（20μL体系，在样品制备室进行）
3.1如果做定量分析并且只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复，则标记N+4个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），1个用于PCR阳性对照（直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板）。

EFNB1 Others Human 人 EphrinB1 / EFNB1 人细胞裂解液 (阳性对照)	CYT 19： 甲基转移酶cyt-19抗体 0.2ml	植物/ATP酶(Na+/K+-ATPase)活性比色法定量检测试剂盒20次
人前列腺癌细胞;DU 145 [DU145;DU-145]	Rhesus antibody Rh COX7A2 细胞色素c氧化酶COX7A2抗体 规格 0.1ml	HumanFreeerythrocyteproloporphyrin,FEPELISAKit 人游离原卟啉(FEP)elisa试剂盒
人正常肝细胞;L-02	ICAM1 Kit Mouse 小鼠 ICAM-1 / CD54 ELISA配对抗体 ELISA	猪β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒
Tca-8113(人舌鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 野生型人c-kit受体细胞株;A7d	人αL岩藻糖苷酶(AFU)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒	大鼠多巴胺   英文名称：   Rat Dopamine
仓鼠卵巢细胞;Lec1	ELISAKienin兔肾素规格：48T/96T	血钙浓度测试盒   可见分光光度法   50管/48样
Anti-TGF- BetaR 2/FITC 荧光素标记转移生长因子–β受体2抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	乙肝表面抗原大蛋白(HBV-LP)elisa试剂盒	人艾柯病毒IgMelisa试剂盒
MMP9： 基质金属蛋白酶9抗体 0.1ml	人尿素酶相关蛋白C(UreC)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒	人抗型肝炎病毒抗体(ai-HCV)elisa试剂盒
Anti-MTL/FITC 荧光素标记胃动素抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	王不留行染料法PCR鉴定试剂盒组织硬脂酰辅酶A去饱和酶(STEAROYLCOADEHYDROGENASE)活性薄层色谱(TLC)同位素法定量检测试剂盒20次	人表面膜免疫球蛋白D(mIgD)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
GIP(Human gastric inhibitory polypeptide) ELISA Kit 人胃抑素Multi-class antibodies规格： 48T	humanhepatitisEvirusIgM,HEV-IgMELISAKit 人戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)elisa试剂盒	γ干扰素   英文名称：   Rabbit γ Ierferon
IgG/APC APC标记的小鼠抗IgG 0.1ml	豚鼠生长激素(GH)elisa试剂盒	小鼠活化素elisa试剂盒

下面只以定量分析为例描述操作步骤。
1．PCR 操作各阶段应严格分区操作，避免交叉污染。
2．试剂盒各组分使用前应充分融化混匀，离心数秒后使用。
3．各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4．待测标本若不及时检测，应保存于-20℃或-70℃。
5．样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6．PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7．本试剂盒仅用于科研使用，不做为临床诊断使用。