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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
55
- 英文名:
Bulbus fritillariae cirrhosae
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 川贝母PCR鉴定试剂盒 | 50T | LZ-P2266 |
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品DNA模板,引物和探针经过优化,灵敏性高,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标DNA高度保守区设计,不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应,既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级,本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】
【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有N个样品,最好设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取:核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应(20μL体系,在样品制备室进行)
3.1如果做定量分析并且只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复,则标记N+4个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),1个用于PCR阳性对照(直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板)。
| TNFRSF1A Others Rat 大鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 人细胞裂解液 (阳性对照) | ELISAKitOPG小鼠骨保护素规格:48T/96T |
| CM-M094小鼠胎儿表皮角质形成层细胞完全培养基100mL | 埃博拉病毒(EBOV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T |
| 大鼠气管和支气管上皮细胞完全培养基 100mL | 人胸腺活化调节趋化因子(TARC/CCL17)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 |
| REG1A Others Cynomolgus 食蟹猴 REG1A / PSPS 人细胞裂解液 (阳性对照) | 组织长链脂酰辅酶A合成酶(ACYLCOASYHETASE)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒20次 |
| MA-782(小鼠癌细胞) 5×106cells/瓶×2 | HumanUlaSensitivegrowthhormone,US-GHELISAKit 人超敏生长激素(US-GH)elisa试剂盒 |
| CBP(CREB-binding protein) CREB结合蛋白抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg | 小鼠胶原酶II(Collagenase II)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 |
| NA ELISA Kit 大鼠去甲Multi-class antibodies规格: 48T | 荧光定量PCR分析20样本 |
| Hpt/Haptoglobin: 结合珠蛋白/触珠蛋白抗体 0.1ml | PorcineImmunoglobulinG,IgGELISAKit 猪免疫球蛋白G(IgG)elisa试剂盒 |
| Anti-IGSF8/CD316 免疫球蛋超家族成员8抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml | 大鼠醌氧化还原酶1(NQ01)elisa试剂盒 |
| 血管紧张素转换酶抗体 Anti-ACE1 0.1ml | 鸡0酯酶C(PLC)elisa试剂盒 |
| Gal-6S(Mouse galactose-6-sulphate sulphatase) ELISA Kit 小鼠半乳糖6酯酶 96T | 人血管内皮生长因子受体1(VEGFR1/FLT1)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human VEGFR1/FLT1 (Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 1) ELISA Kit |
| Rhesus antibody Rh TTX(5E7) 河素单克隆抗体 规格 1ml | 人抗突变型瓜酸波形蛋白抗体elisa试剂盒 |
| Rhesus antibody Rh OGG1/8 hydroxyguanine DNA glycosylase 8-羟基鸟嘌呤DNA糖基化酶 规格 0.1ml | 川贝母PCR鉴定试剂盒人卵清蛋白特异性IgG(OVAsIgG)ELISAKit ELISA. 96T/48T |
| 沙眼衣原体(CT)elisa试剂盒 | 小量琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒 Small agarose gel DNA recycling Kit |
| 人复合前列腺特异性抗原(CPSA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 | EthidiumBromide(EB) 1ml(10mg/ml) |
下面只以定量分析为例描述操作步骤。
1.PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2.试剂盒各组分使用前应充分融化混匀,离心数秒后使用。
3.各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4.待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
5.样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6.PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7.本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
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文献和实验的,为此政府已建立了检测食品中转基因成分的体制。其中,最重要的是转基因检测方法的可靠性和有效性。所以我们利用分子生物学技术建立起一套基于PCR反应的实验方案,用于食品质控实验室的工作。最要害的是第一步:DNA提取,我们做了很严格的监控 。我们依据植物基因组和质粒DNA的提取效率来选择DNA提取试剂盒。整个提取过程包括破坏细胞壁、去除RNA和利用沉淀去除蛋白质,然后将DNA吸附在层析柱上,经过洗涤后再洗脱下来。类似的方法已经用于从其他一些植物和病毒中提取DNA。PCR反应的过程分为三个阶段:(1)通过加热
。 PCR扩增每个基因座的多态性区域是分析精子的第一步。两个基因座用两组引 物,同时引物必须位于多态性区域的边侧。当精子两个靶序列经PCR扩增,就确定了 每个基因座的等位基因成份。人工合成的寡核苷酸探针可识别等位基因小到仅发生单 个碱基置换的实验方法已得到改进,这些等位基因牧场划的寡聚物(ASO)探针第一 次应用是将人正常β珠蛋白基因中的正常βA等位基因与镰刀形红细胞(βA)的突变 区分开来。本方法检测等位基因需要人工合成的小片段寡核苷酸(典型的长19bp)。 每个寡核苷酸与一个等位
min左右后进行电泳。(3)溴化乙锭(EB)(10mg/ml):在20ml水中加入0.2g溴化乙锭,磁力搅拌数小时。然后用铝箔包裹容器或将溶液转移至棕色瓶中,室温保存。(4)加样缓冲液(Loading Buffer)一般为6×Loading Buffer二、电泳鉴定时注意事项:佩戴一次性手套,避免皮肤接触EB。无路做胶还是电泳缓冲液尽量用新的,不要超过两周。三、电泳步骤1、50×TAE取10ml稀释成500ml,取50ml溶解0.5g琼脂糖。电炉上煮沸后加入EB 5ul。另外450ml TAE倒入
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