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Suspension™ CHO
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22
Suspension™ CHO (XF) Medium
2年
上海启达生物科技有限公司
-20度
500ml
Suspension™ CHO (XF) 细胞悬浮培养基是一种化学限定、无动物成分的培养基,为中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞的长期生长而开发。培养基中无大分子,可实现细胞分泌蛋白的分离和纯化,培养基采用丙谷酰胺代替L-谷氨酰胺,减少胺积累,与含有10%血清的正常培养基生长周期保持一致。
培养基组成:500ml Suspension™ CHO (XF) 细胞悬浮培养基(启达生物:SP04),5ml G/A(启达生物 :SD0038)
操作步骤:
细胞从常规培养基到无血清培养基的适应性训练方法根据细胞的类型分为2种:
对于悬浮细胞(需要2-6周):
1. 当细胞密度达到最大时开始适应性训练;
2. 加入无血清培养基,使无血清培养基和正常培养基的比例变为原来的1/2
3. 当细胞密度达到最大时,加入无血清培养基,使细胞密度成为原来的1/5;
4. 培养细胞,如果细胞达到最大密度时,细胞的存活率大于85%,并且达到最大密度的时间与之前
相近,那么细胞可以继续进行适应性训练;如果细胞显示生长缓慢或者存活率降低,那么需要重复2-3步鄹3次;
5. 可逐步提高无血清培养基的比例,直至细胞可以完全在无血清培养基中生长。
对于贴壁细胞(需要2-6周):
1. 细胞达到最大密度时,开始适应性训练;
2. 胰酶消化贴壁细胞,350×g离心5min收集细胞,用含5%血清的无血清培养基重悬,使细胞密度达
到3.0×105cells/ml。
3. 培养细胞至达到最大密度;
4. 重复2 - 3步骤,依次在无血清培养基中加入2%,1%,0.5%和0.1%的血清,进行细胞培养;如果细胞的存活率低于80%,那么需要恢复至前一个血清的含量,或者采用更加细化的递减含量。
5. 无血清培养基培养细胞。
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