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![NCI-H520 [H520]（人肺癌细胞）](https://img1.dxycdn.com/2023/0911/638/4855789367693901071-14.jpg!wh200)
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
NR8383大鼠肺泡巨噬细胞
- ATCC Number：
/
- 细胞类型：
科研细胞
- 肿瘤类型：
/
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 库存：
10
- 英文名：
NR8383
- 生长状态：
/
- 年限：
尽快解冻复苏细胞进行培养
- 运输方式：
快递形式
- 器官来源：
/
- 是否是肿瘤细胞：
/
- 细胞形态：
正常
- 免疫类型：
NR8383大鼠肺泡巨噬细胞
- 物种来源：
NR8383大鼠肺泡巨噬细胞
- 相关疾病：
NR8383大鼠肺泡巨噬细胞
- 组织来源：
NR8383大鼠肺泡巨噬细胞
- 规格：
1x10^6
细胞特性：
1） 来源：见说明
2） 形态：请直接向我司客服索取
3） 含量：>1x10^6 细胞数
4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
5） 用途：仅供科研使用。
6） 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：
取出25cm2培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态，然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1500rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀细胞用12ml完全培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，最后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）待细胞完全贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。
3、细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1500rpm离心5min；
3）用适量的冻存液（基础培养基：FBS：DMSO=5:4:1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。
4、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中， 1500rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀用5ml完全培养基重悬，接种25cm2培养瓶，于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。
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文献和实验6mg/Kg(PTX组); 脂多糖预处理组（12只），连续三天 腹腔内注射脂多糖0.5、0.5和1mg/Kg, 第四天腹腔内注射脂多糖6mg/Kg(LPr组)。在注射生理盐水或LPS后4小时开胸采集左肺，测肺干湿比；将99mTc标记的白蛋白注入大鼠体内，测定肺泡灌洗液和血浆中放射性比值，表示肺泡蛋白漏出；凝胶电泳迁移率法（EMSA）检测肺泡巨噬细胞核因子κB活性；右心室血测血栓弹力图（TEG）和血浆纤维蛋白原浓度；TUNEL法检测肺组织凋亡。各组肺行HE染色，作病理学观察。
实验材料： 1. 肺泡巨噬细胞来源：体重为2—3kg的成年兔。也可使用成年大鼠； 2. 灌洗液：不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.4； 3. 培养液：MEM培养液，添加谷氨酰胺1mmol/L、卡那霉素100µg/ml、青霉素200IU/ml、链霉素200µg/ml、HEPES 10mmol/L和10%胎牛血清； 4. 无菌手术器械：手术刀、解剖剪、解剖镊、止血
巨噬细胞，包括肝星状细胞、肺泡巨噬细胞、腹腔巨噬细胞和脾巨噬细胞等，以及某些肿瘤细胞，均可产生并释放LP。 近年来对LP的系统研究中，发现它除引起发热外，还引起许多疾病急性期反应，表明其生物活性与白细胞介素-1（interleukin-1，IL-1）一致，现已公认LP就是IL-1。由于从不同侧面研究IL-1或LP，对它的细胞来源有了更多了解。根据目前所知，能产生IL-1（LP）的细胞种类，可列表如下（表4-1）。 表4-1 LP（IL-1）的细胞来源
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