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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 检测方法:
Sandwich-ELISA/双抗体夹心ELISA
- 适应物种:
Human/人
- 样本:
Serum, Plasma, Other biological fluids/血清、血浆等其它生物样品
- 供应商:
elabs
- 检测范围:
0.31-20 ng/mL
- 规格:
96T
英文名称/English Name:Human DDT (D-Dopachrome Tautomerase) ELISA Kit
货号/Catalog Number:E-EL-H2375
种属/Organism:Human/人
指标名称/Other Names:DDT
检测方法/Method:Sandwich-ELISA/双抗体夹心ELISA
检测范围/Detection Range:0.31-20 ng/mL
灵敏度/Sensitivit:0.19 ng/mL
检测样品/Sample Type:Serum, Plasma, Other biological fluids/血清、血浆等其它生物样品
检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人DDT抗体包被于酶标板上,实验时标本或标准品中的DDT会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人DDT抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人DDT抗体与结合在包被抗体上的人DDT结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物,TMB在辣根过氧化物酶的催化下现蓝色,加终止液后变黄。用酶标仪在450nm波长处测OD值,DDT浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线求出标本中DDT的浓度。
标本收集:
血清:全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。血浆:抗凝剂推荐使用EDTA,标本采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可检测。避免使用溶血,高血脂标本。其它生物标本:1000×g离心20分钟,取上清即可检测标本应清澈透明,悬浮物应离心去除。标本收集后若不及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃/-80℃电冰箱内,避免反复冻融,6个月内进行检测,4℃保存的应在1周内进行检测。 如果样本中检测物浓度高于标准品最高值,请根据实际情况,做适当倍数稀释(建议先做预实验,以确定稀释倍数)。
试验所需自备物品:
酶标仪(450nm波长滤光片)高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL37℃恒温箱, 双蒸水或去离子水
关键词:人D-多巴色素变位酶(DDT)Elisa试剂盒,人Elisa试剂盒,小鼠elisa试剂盒,大鼠elisa试剂盒
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文献和实验离心后小心地倒去乙醇液。沉淀干燥后,加入20~50μlTE 缓冲液或无菌去离子水 中溶解,即为制好的DNA模板。 目前还有一些非常有效的商售试剂盒可用于纯化 PCR 产物,如 Oiagen PCR 产物纯化试剂盒等,但成本较高。 2 手动DNA 序列分析技术 2.1 测序胶的制备 按以下配方制备测序电泳胶: 6%胶工作液 70ml 10%过硫酸胺(APS) 70μl(新鲜配制) TEMED 70μl 将上述溶液混合后,灌入准备好的胶板中,将“鲨鱼
去离子水中溶解,即为制好的DNA模板。 目前还有一些非常有效的商售试剂盒可用于纯化 PCR 产物,如 Oiagen PCR 产物纯化试剂盒等,但成本较高。 2 手动DNA 序列分析技术 2.1 测序胶的制备 按以下配方制备测序电泳胶: 6%胶工作液 70ml 10%过硫酸胺(APS) 70μl(新鲜配制) TEMED 70μl 将上述溶液混合后,灌入准备好的胶板中,将“鲨鱼齿”梳子反插入胶,深约0.5~1.0cm。室温下聚合1 小时左右2.2
Raf 蛋白 Ras 结合结构域的简并进化库合成以及利用片段互补法快速筛选二氢叶酸还原酶的快速折叠且稳定的克隆
聚合酶(Fermentas)。 ( 3 ) 琼脂糖凝胶:agarose (Bioshop) Dark reader™ (Clare Chemical Research ) 和 GelstarTM ( Biowittaker Molecular Applications)。 ( 4 ) 凝胶纯化试剂盒:QIAEX™II 或 QIAquick™gelextractionkit ( Qiagen) 更好。 2.2 文库的克隆和纯化 ( 1 ) 质粒 PQE-32△F
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