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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
1年
- 英文名:
Poly(A) Polymerase(5U/μL)
- 库存:
999
- 供应商:
百生跃(Bioleaper)
- 规格:
1mL/100U/500U
| 规格: | 1mL | 产品价格: | ¥66000.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100U | 产品价格: | ¥354 |
| 规格: | 500U | 产品价格: | ¥1412 |
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文献和实验标记,可以合成核酸后自行添加,部分已知蛋白有商业化的抗体也可以直接购买。现在大多数实验室已经不再使用放射性标记,生物素使用相对较多。2、形成蛋白-探针复合物(1)在0.5ml离心管中按顺序将下列组份混匀:蛋白样本(2-5μg)Xμlpoly d(I-C)1μlBinding Buffer2μlNuclease-Free ddH2OXμl总体积9μl(2)冰浴5min后,加入1μ探针。(对照组加1ul对照探针)(3)PCR仪中室温(20-23℃)温育30min。3、制备凝胶,电泳(1)制备6.5%非变性聚丙
获得cDNA。为了获得最长的cDNA,需要按经验确定每个RNA样品中引物与RNA的比例。随机引物的起始浓度范围为50到250ng每20μl反应体系。因为使用随机引物从总RNA合成的cDNA主要是核糖体RNA,所以模板一般选用poly(A)+RNA。 Oligo(dT)起始比随机引物特异性高。它同大多数真核细胞mRNA 3"端所发现的poly(A)尾杂交。因为poly(A)+RNA大概占总RNA的1%到2%,所以与使用随机引物相比
probe and 0.5 μg of poly(dI/dC) in 20 μl of 1X Binding buffer. Incubate at RT for 20 min. 4. Add 2 μl of loading dye, load total amount of the sample on 4% 0.25X TBE gel which has been pre-run for at least 20 min in 0.25X TBE buffer.
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