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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
293E稳定表达EBNA1的人胚肾细胞
- ATCC Number:
/
- 细胞类型:
科研细胞
- 肿瘤类型:
/
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 库存:
10
- 英文名:
293E
- 生长状态:
/
- 年限:
尽快解冻复苏细胞进行培养
- 运输方式:
快递形式
- 器官来源:
/
- 是否是肿瘤细胞:
/
- 细胞形态:
正常
- 免疫类型:
293E稳定表达EBNA1的人胚肾细胞
- 物种来源:
293E稳定表达EBNA1的人胚肾细胞
- 相关疾病:
293E稳定表达EBNA1的人胚肾细胞
- 组织来源:
293E稳定表达EBNA1的人胚肾细胞
- 规格:
1x10^6
细胞特性:
1) 来源:见说明
2) 形态:请直接向我司客服索取
3) 含量:>1x10^6 细胞数
4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
5) 用途:仅供科研使用。
6) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出25cm2培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态,然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。

2、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀细胞用12ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。


3、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm离心5min;
3)用适量的冻存液(基础培养基:FBS:DMSO=5:4:1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。

4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中, 1500rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。

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文献和实验Growth, Maintenance and Transfection of Suspension Adapted 293-EBNA cells
Procedure I. INTRODUCTION The 293 EBNA cell line is established from primary embryonal human kidney cells transformed with sheared human adenovirus type 5 DNA and Epstein-Barr virus nuclear antigen 1, allowing episomal amplification
人类组织正常及永生化细胞293E E转化人胚肾293细胞(B类)293ET ET转化人胚肾293细胞(B类)293KB KB转化人胚肾293细胞(B类)293T 人胚肾T细胞A7d 野生型人C-KIT受体细胞株(B类)AMS3(SCF3) 人干细胞因子单克隆抗体细胞株(B类)APP-PS1 人APP-PS1双基因转染细胞株(HEK293)(B类)FC33 ASP2 人胚胎肾细胞转化细胞(B类)FIP293 FIP293(来源于HEK293)(B类)HEK-293 人胚肾细胞
起始序列和病毒包装信号序列,并插入了腺相关病毒的rep基因和两端的ITR序列,目的基因则插在腺相关病毒的两个ITR之间。这样的载体既具有单纯疱疹病毒能够进入并定位于细胞核的特点,又具有腺相关病毒能够扩增外源基因并将其整合在人类非分裂细胞染色体特定位置的特点;同时,也克服了前者不兼容外源启动子的弱点,避免了后者包装容量低的不足。离体实验证明,受单纯疱疹病毒/腺相关病毒嵌合载体感染的分裂细胞经过一定时间的选择后,可以形成稳定表达目的基因的细胞克隆,且对细胞的毒性很小。 (2)腺病
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