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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温
- 保质期:
1年
- 英文名:
MES-buffered saline (5X), pH 6.5
- 库存:
999
- 供应商:
百生跃(Bioleaper)
- CAS号:
/
- 规格:
250mL
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文献和实验: a)氯(-),由胶缓冲液提供,充当快速移动的先导离子。b)MES或MOPS(-),(取决于电泳缓冲液的选择)充当后随离子。MES: 2-(N-morpholino)ethane sulfonic acidMOPS: 3-(N-morpholino)propane sulfonic acidc)Bis-Tris碱(+)充当出现在胶中的共同离子,Tris(+)由电泳缓冲液提供。合并低pH值的胶缓冲液(pH6.4)和电泳缓冲液(pH7.3-7.7)导致了电泳时显著降低的工作pH值。图2 NuPAGE®
一. 实验原理SDS-PAGE是对蛋白质进行量化,比较及特性鉴定的一种经济、快速、而且可重复的方法。该法是依据混合蛋白的分子量不同来进行分离的。SDS是一种去垢剂,可与蛋白质的疏水部分相结合,破坏其折叠结构,并使其广泛存在于一个广泛均一的溶液中。SDS蛋白质复合物的长度与其分子量成正比。在样品介质和凝胶中加入强还原剂和去污剂后,电荷因素可被忽略。蛋白亚基的迁移率取决于亚基分子量。二. 试剂和器材试剂:1. 5x样品缓冲液(10ml):0.6ml 1mol/L的Tris-HCl(pH6
4 r/min离心20min。 9.将沉淀物用50%饱和硫酸铵洗1次,同样离心。 10.将沉淀物悬混于5ml蒸馏水中,以pH6.75缓冲盐水透析3天,每天换水1次。(缓冲盐水由1.35×10 4 ml生理盐水, 25ml 1.5Mol/L醋酸钠和75ml 2Mol/L醋酸铵配成)。 11.1.5×10 4 r/min(4℃)离心20min,吸取上清,于OD 280 nm和OD 403
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