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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
999
- 供应商:
百生跃(Bioleaper)
- 英文名:
Eugon LT 100 Agar
- 规格:
250g
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文献和实验平板状,电泳缓冲液覆盖在平板表面,加样后,通电进行电泳,故称为潜水式电泳。【实验试剂与器材】1. 5×TBE: 54 g Tris 碱,27.5 g 硼酸,20 mL 0.5mol/L EDTA(pH 8.0),配 1 升。2. 0.5xTBE: 取 5×TBE 作 10 倍稀释3. 溴化乙啶液: 10 mg/mL 水4. 6×载样缓冲液: 0.25% 溴酚蓝,40%(W/V) 蔗糖水溶液【实验方法与步骤】1. 铸胶 1 g 琼脂糖加 0.5xTBE 缓冲液 100 mL,在微波炉上加热融化,冷却至放在
,加2滴碘液,如无蓝色出现,即表示糖化完全)。 (3) 糖化液用4-6层纱布过滤,滤液如仍混浊,可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清,加水20 ml,调匀至生泡沫,倒入糖化液中,搅拌煮沸,再过滤)。 (4) 用波美比重计检测糖化液中糖浓度,将滤液用水稀释到10-15波林,调pH至6.4。如当地有啤酒厂,可用未经发酵,未加酒花的新鲜麦芽汁,加水稀释到 10-15波林后使用。 (5) 如配固体麦芽汁培养基时,加入2%琼脂 ,加热融化,补充失水。 (6) 分装、加塞、包扎。 (7) 高压蒸汽灭菌 100 Pa
冰上,置水平摇床上) 4. 4℃,14000g离心15min,立即将上清转移到一个新的离心管中 5. 准备Protein A agarose,用PBS 洗两遍珠子,然后用PBS配制成50%浓度,建议减掉枪尖部分,避免在涉及琼脂糖珠的操作中破坏琼脂糖珠 6. 每1ml总蛋白中加入100μl Protein A琼脂糖珠(50%),4℃摇晃10min(EP管插冰上,置水平摇床上),以去除非特异性杂蛋白,降低背景 7. 4℃,14000g离心15min,将上清转移到一个新的离心管中,去除Protein
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