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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
﹣20℃
- 保质期:
两年
- 英文名:
EnzyValley
- 库存:
20
- 供应商:
广州英赞生物科技有限公司
——耐尿嘧啶热启动高保真DNA聚合酶 预混液
【产品概述】
PfuMax U DNA聚合酶是在保留PfuMax高保真DNA聚合酶的所有强大的功能特性的基础上开发而成,解决了校正DNA聚合酶由于存在尿嘧啶结合结构域而导致的不能扩增含尿嘧啶DNA模板的实验问题。
耐尿嘧啶热启动高保真DNA聚合酶:该酶利用抗体修饰的方法实现60℃以下可逆失活,只有在PCR反应第一步预变性时其活性才释放出来,大幅改善了PCR的特异性和扩增效率。
其它剂型
为了加样方便,PfuMaxU DNA聚合酶提供2×预混液。对于任何模板DNA,该预混液都可进行快速、灵敏及耐抑制剂的PCR。
| 种类 |
产品名称 |
规格 |
货号 |
| 单酶(提供标准缓冲液) |
PfuMax U HotStart DNA Polymerase |
200 U/1,000 U |
T127A/B |
| 预混液 |
2×PfuMax U HotStart PCR ProMix |
1 mL/5 mL |
T128A/B |
【产品应用】
重亚硫酸盐转化的DNA的扩增,受损或陈旧DNA的扩增,残余污染控制,基于Uracil-excision(USER)的克隆方法。
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文献和实验和酶混合好,然后分装,这样即可以减少操作,避免污染,又可以增加反应的精确度。 2. 反应液污染 可采用下列方法之一处理: 1)DNase I法:PCR混合液(未加模板和Taq聚合酶)加入0.5 U DNase I,室温反应30 min后加热灭活,然后加入模板和Taq聚合酶进行正常PCR扩增。该方法的优点是不需要知道污染DNA的序列; 2)尿嘧啶糖苷酶(UNG)法 由于UV照射的去污染作用对500 bp以下的片段
体。 pGEM®-TEasy载体的多克隆位点区含有一些这样的限制性酶切位点,采用这些酶进行单酶切消化即可释放插入片段。如pGEM®-TEasy载体多克隆区的EcoRⅠ、BstZⅠ和NotⅠ酶切位点。这种载体也可选用适当的双酶切消化释放插入片段。 pGEM®-TEasy载体含有丝状噬菌体f1复制起始子,可用于制备单链DNA(ssDNA参见第Ⅶ部分)。单链DNA分子对应于图1底部一条链,代表pGEM®-TEasy载体。 pGEM®-TEasy载体系统包含2×快速连接缓冲液,用于连接PCR产物。采用这种
称 引物比例的扩增效率比两种引物均过量80-90%)的扩增效率低(70%)。在实验中,这可 通过增加PCR循环的次数来弥补。若不对称的PCR反应不能产生足够数量的ssDNA,可 以试一试不同的引物比率;b).再加5-10个PCR循环;c).在最后五个循环中多加Tab聚合 酶(2U);d).试一下相反的不对称引物比率。有时,相反的不对称引物比率可能给出不 同产量的ssDNA。制备出的单链DNA用限量的那个PCR引物或用一个内引物来测序,并 应用常规方法进行掺入测序(incorporation
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