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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
50
- 英文名:
NCI-H211 [H211]
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| NCI-H211 [H211]细胞 | T25瓶 | LZ-X8936 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| PrimaCell™大鼠神经小胶质细胞试剂盒 | Promocell C-22070 Myocyte GrowthMedium, 心肌细胞生长培养基(即用型) 500ml十二烷基磺酸钠10克 |
| PrimaCell™大鼠胎儿表皮角质形成层细胞试剂盒 | 人表皮角质细胞RNAHEK miRNA5 μg匹格列酮标记的d4Pioglitazone - Labeled d4 |
| MiaPaCa-2, 人胰腺癌细胞吲哚-3-羧醋;3-羧基吲哚 Indolq-3-ccrboxylic ccid;3-Ccrboxyindolq 771-20-6 | BC-019(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠瘤细胞;P388D1(IL-1)533-67-52-脱氧-D-核糖2-Deoxy-D-ribose |
| 人乳腺MatchPair™:乳腺上皮细胞和肿瘤原代细胞【Human Breast MatchPair™: Normal Human Mammmry Epithelial Cells and Mammmry Carcinoma Cells】 | NINJ1 Others Rat 大鼠 Ninjurin-1 / NINJ1 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-去乙酰基维库溴铵3-Desacetyl Vecuronium |
| 人胚胎皮肤成纤维细胞;HES 人胎盘滋养层细胞完全培养基 100mL固K,英文名或英文缩写:Fast Black K Salt,级别:超,99%,规格:25克 | MDA-MB-453 人癌细胞芥酸(标准品)Erucic acid质量规格:分析标准品 |
| 小鼠胃粘膜上皮细胞【Mouse Gastric: Normal Gastric Mucosal Epithelial Cells】 | NEI-H209细胞,小细胞肺癌细胞 人前列腺癌细胞,22RV1细胞 人脉络丛成纤维细胞RNAHCPF miRNA5 μg磺胺(标准品)质量规格:检查Sulfanilamide |
| 人肝实质细胞完全培养基 100mL1-硝基芘(>98.0%(GC))质量规格:>98.0%(GC)1-Nitropyrene | MAPK1 Others Mouse 小鼠 ERK2 / MAPK1 / MAPK2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 茜素红Alizarin red质量规格:AR |
| 大鼠直肠上皮细胞【Rat Rectum:Normal Rectum Mucosa Epithelial Cells】 | LRP11 Others Human 人 LRP11 人细胞裂解液 (阳性对照) 美托拉宗质量规格:>99%,BRMetolazone |
| 兔晶体上皮细胞永生系;N/N1003A(RLE)无水录化(II) CHROMIUM(II) CHLORIDq 10049-02-2 | LTEP-a-2(人肺腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2柠檬酸锂四水(>98%,BR)Lithium , tetrahydrate质量规格:>98%,BR |
| PrimaCell™大鼠小梁网细胞试剂盒 | 人正常前列腺基质永生化细胞;WPMY-1阿替洛尔酸Metoprolol Acid |
| LLC(小鼠肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H2N2 (A/Guiyang/1/1957) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 多沙普仑Doxapram | 人正常肝细胞;L-02尿嘧啶(标准品)Uracil 质量规格:含量测定 |
| 主动脉内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)乙二醇双(2-氨基乙基)四乙酸EGTA, egtazic acid质量规格:>98%,分子生物学级 | 人一氧化碳血红蛋白酶联免疫试剂盒 |
| NCI-H211 [H211]细胞山羊皮肤成纤维样细胞;DG-S1槐属苷(标准品)Sophoricoside质量规格:HPLC≥98%,标准品 | 人尿素酶相关蛋白C酶联免疫试剂盒 |
| C918(人眼脉络色素瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 原代神经胶质细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装:1mlChromiumpicolinate羧酸100微升AR,98% | 人肌球蛋白酶联免疫试剂盒 |
| CL-0246YAC-1(小鼠瘤细胞)5×106cells/瓶×2酮洛芬(标准品)Ketoprofen质量规格:HPLC>98%,标准品 | 人α-辅肌动蛋白3酶联免疫试剂盒 |
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文献和实验1 PA211-2I3X3 PZ211-1U6X4 PZ211-2U1X9 PS211-1P4XA PS211-1Q7XB PP211-1F2XD PZ211-2U3D3 HD284D-2X1 TD184H-1X2 TD184D-BX1 TD184I-CS1 PZ384-TD184U-2X3 PZ384-TD184U-2D2 PD204F-1K1 PD205U-9X1 TR204U-2D1 PZ194
方法1、培养液中按1%的体积加双抗(含青霉素1万U/ml,链霉素0.01g/ml)及肝素液(含肝素100U/ml)。用3.5%NaHCO3液调pH值为7.2~7.4,然后加灭活的小牛血清,使浓度为20%。再加PHA(50U~75U/ml),无菌分装于培养瓶内,每瓶1ml。2、无菌操作采血,并以肝素抗凝,同时进行白细胞计数及分类计数。3、取0.1ml抗凝血,加入到含1ml培养液的培养瓶中,每个血样接2~3个培养瓶。如果以血浆或分离的淋巴细胞代替全血,加入培养瓶中更好。4、37℃培养72h,在培养结束前16h
一、实验材料NCI-H1299,购自上海晶莱生物技术有限公司。表 2.1.1 主要试剂试剂与耗材厂家(货号)细胞培养瓶FALCON 中国(353014)Penicillin/streptomycin solution(KGY002)0.25% Tripsin-EDTA(BK-E3076)PBS(BK330-2)胎牛血清GIBCO 美国(10270-106)1640 培养基Hyclone 美国(SH3080901)Annexin V-FITC/PI 凋亡试剂盒 二、实验仪器表 2.2.1 主要
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