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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
46
- 英文名:
NCI-H187 [H187]
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| NCI-H187 [H187]细胞 | T25瓶 | LZ-X8934 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| PrimaCell™大鼠淋巴成纤维细胞试剂盒 | MG-63(人骨肉瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CD320 / 8D6A 人细胞裂解液 (阳性对照) 牛血清白蛋白标准溶液shēng huà shì jì容量:1公斤 |
| PrimaCell™大鼠小梁网细胞试剂盒 | 人胃癌细胞;MGC-803羟基伐伦克林Hydroxy Varenicline |
| PLA2G2E Others Mouse 小鼠 PLA2G2E 人细胞裂解液 (阳性对照) LACTOSE乳糖美国国家处方级 50KG | KLK7 Others Mouse 小鼠 KLK7 / Kallikrein 7 人细胞裂解液 (阳性对照) 金丝shēng huà shì jì容量:100克 |
| 人结肠MatchPair™: 结肠上皮细胞和肿瘤原代细胞【Human Colon MatchPair™: Normal Human Colonic Epithelial Cells and Colonic Carcinoma Cells】 | 人脑膜细胞cDNAHMC cDNA赤藓红B(>95.0%(E))质量规格:>95.0%(E)Erythrosine B |
| 人细胞;Hela P10s-11F2-氨基-9,9-二甲基芴(>98.0%(HPLC)(T))质量规格:>98.0%(HPLC)(T)2-Amino-9,9-dimethylfluorene | RK2 Others Human 人 RK2 / k-B / KB 人细胞裂解液 (阳性对照) 氟化镁(>98%,BR)Magnesium fluoride质量规格:>98%,BR |
| 小鼠小肠平滑肌细胞【Mouse Intestine: Normal Small Intestinal Smooth Muscle Cells】 | RK3 Others Mouse 小鼠 RK3 / kC 人细胞裂解液 (阳性对照) 磺胺二甲嘧啶质量规格:≥99%,BRSulfamethazine |
| 人胰腺腺泡上皮癌;HPAC1-溴-4-癸基苯(>88.0%(GC))质量规格:>88.0%(GC)1-Bromo-4-decylbenzene | Y2细胞,小鼠成纤维细胞 人卵巢癌顺铂耐药株,COC1/CDDP细胞 人食道上皮细胞裂解物HEEpiCL十五氟辛酸(约5mmol)[离子对色谱级]IPC-PFFA-8 (ca. 5mmol)质量规格:用于液相色谱-质谱的离子对试剂 |
| 大鼠胎儿真皮组织提取物【Embryo: Normal Rat Fetal Dermal Derivatives】 | CM-R073大鼠心肌细胞完全培养基100mL溴酚红质量规格:ARBromophenol red |
| tTA基因修饰的小鼠胰腺癌细胞(B类);Pan02-CAG-tTA-4B3秦皮苷(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Fraxin | MDA-MB-453人癌细胞 Human breast cancer cell line MDA-MB-453 L-15+10%FBS氟乐灵标准溶液(100μg/ml,u=3%)Trifluralin solution质量规格:100μg/ml,u=3% |
| PrimaCell™大鼠肠巨噬细胞试剂盒 | HCC1937细胞,人癌细胞 鼠胸腺激酶缺陷细胞株,L-MTK细胞 原代表皮角化细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装:500/100mlDL-半胱氨酸质量规格:>97%,易氧化DL-Cysteine |
| 人真皮成纤维母细胞-胎儿HDF-f6,7,8,9脱氢帕潘立酮盐酸盐6,7,8,9 Dehydro Paliperidone Hydrochloride | COLO 205细胞,结肠癌细胞 正常人肝细胞,L-02细胞 CL-0056CCD-1095Sk(人浸润性导管癌旁皮肤细胞)5×106cells/瓶×2复壁碳纳米管 小于10nm(直径),5-15μm(长度)(允许温度上限:620℃)Carbon Nanotube Bundled Multi-walled below 10nm(diam.), 5-15µm(length) (allowable temperature limit : 620°C)质量规格: |
| L-O2 人正常胎肝细胞三氯氨铂酸钾Potassium trichloroammineplatinate(II)质量规格:>95% | 人胰岛淀粉样多肽酶联免疫试剂盒 |
| NCI-H187 [H187]细胞HBL-100(人整合SV40基因的上皮细胞) 5×106cells/瓶×2TGX221TGX-221质量规格:>98%,特异性的p110β抑制剂 | 人凝溶胶蛋白酶联免疫试剂盒 |
| U251 人神经胶质瘤细胞75621-03-33-[3-(胆酰胺基)二甲基]磺酸内盐CHAPS | 人肌酸激酶同工酶MB酶联免疫试剂盒 |
| RTN4R Others Human 人 RTN4R / NOGOR 人细胞裂解液 (阳性对照) 十八烷(标准品)Octadecane质量规格:分析标准品,≥99.5%(GC) | 人α-黑色素细胞刺激素酶联免疫试剂盒 |
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文献和实验方法1、培养液中按1%的体积加双抗(含青霉素1万U/ml,链霉素0.01g/ml)及肝素液(含肝素100U/ml)。用3.5%NaHCO3液调pH值为7.2~7.4,然后加灭活的小牛血清,使浓度为20%。再加PHA(50U~75U/ml),无菌分装于培养瓶内,每瓶1ml。2、无菌操作采血,并以肝素抗凝,同时进行白细胞计数及分类计数。3、取0.1ml抗凝血,加入到含1ml培养液的培养瓶中,每个血样接2~3个培养瓶。如果以血浆或分离的淋巴细胞代替全血,加入培养瓶中更好。4、37℃培养72h,在培养结束前16h
一、实验材料NCI-H1299,购自上海晶莱生物技术有限公司。表 2.1.1 主要试剂试剂与耗材厂家(货号)细胞培养瓶FALCON 中国(353014)Penicillin/streptomycin solution(KGY002)0.25% Tripsin-EDTA(BK-E3076)PBS(BK330-2)胎牛血清GIBCO 美国(10270-106)1640 培养基Hyclone 美国(SH3080901)Annexin V-FITC/PI 凋亡试剂盒 二、实验仪器表 2.2.1 主要
potential loss and cell cycle arrest》的论文。文章了评估 epicatechin 对 NCI-H2172 非小型细胞肺癌细胞的抗癌作用,重点观测其对自噬细胞死亡、线粒体膜电位 (m) 丧失和细胞周期阻滞的影响。图片来源于 Molecular Medicine Reports 官网然而,就在发表后的第二天,PubPeer 网站上的匿名网友指出,文章 Fig4 中的多个细胞为复制细胞。匿名网友指出,相同颜色圈出的细胞是相同的细胞。图片来源于 PubPeer 官网,相同圈中细胞
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