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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
KYSE510人食管癌细胞
- ATCC Number:
/
- 细胞类型:
科研细胞
- 肿瘤类型:
/
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 库存:
10
- 英文名:
KYSE510
- 生长状态:
/
- 年限:
尽快解冻复苏细胞进行培养
- 运输方式:
快递形式
- 器官来源:
/
- 是否是肿瘤细胞:
/
- 细胞形态:
正常
- 免疫类型:
KYSE510人食管癌细胞
- 物种来源:
KYSE510人食管癌细胞
- 相关疾病:
KYSE510人食管癌细胞
- 组织来源:
KYSE510人食管癌细胞
- 规格:
1x10^6
细胞特性:
1) 来源:见说明
2) 形态:请直接向我司客服索取
3) 含量:>1x10^6 细胞数
4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
5) 用途:仅供科研使用。
6) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出25cm2培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态,然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。

2、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀细胞用12ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。


3、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm离心5min;
3)用适量的冻存液(基础培养基:FBS:DMSO=5:4:1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。

4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中, 1500rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。

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文献和实验流式课堂 | 细胞带有 GFP 荧光时,如何进行流式凋亡分析?
随着生物研究进入基因时代,转染技术的应用越来越广泛。在此过程中,通常会引入 GFP(绿色荧光蛋白)标签,去验证转染是否成功。 在之前的流式课堂中,我们曾多次提到过流式配色问题。今天,就来带大家看看,带有 GFP 标签的细胞,在流式凋亡检测中,应该如何配色和分析结果。 一、如何选择试剂盒 挑选试剂盒时,需要选择干扰少的荧光组合。GFP 的激发/发射波长为 488/510,通常在流式细胞仪中的检测通道为 FL1。因此,我们不能选择荧光标签为FL1检测通道的凋亡检测试剂盒,如 AF488
中。5. 用无菌 PBS 将上述锥形试管填满(至 50 mL)。介绍样品制备。6. 洗涤。在室温、低速制动条件下,以 300 X g 离心分离试管 10 分钟。7. 裂解红细胞(BD 产品目录号:555899,10 x 溶液。在蒸馏水中使用 1 x 溶液。室温孵育 15 分钟。)8. 将 1x106 PBMC 重悬于 20 μL 染色缓冲液中(PBS 含有 5% 正常人血清)。9. 加入抗体:CD117-BV421 (c-kit)、CD7-BV510、CD57- BV605、CD8-BV650
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