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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 库存:
81
- 样本:
组织、水样、血清、血浆及相关液体样本
- 标记物:
hrp辣根过氧化物酶
- 适应物种:
人、小鼠、大鼠、兔、植物....
- 应用:
科研
- 检测方法:
酶联免疫法
- 检测范围:
详询
- 规格:
48T/96T
猪戊型肝炎病毒抗原检测试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
使用目的:
本试剂盒用于测定种属血清,血浆及相关液体样本中戊型肝炎病毒抗原检测含量。
实验原理
试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。
猪戊型肝炎病毒抗原检测试剂盒组成
| 1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1瓶 |
| 2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 标准品(32ng/L) | 0.5ml×1瓶 |
| 3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 标准品稀释液 | 1.5ml×1瓶 |
| 4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 | 1份 |
| 5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2张 |
| 6 | 显色剂B液 | 6ml×1瓶 | 12 | 密封袋 | 1个 |
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
试剂盒相关图片:


操作步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
| 16ng/L | 5号标准品 | 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 8ng/L | 4号标准品 | 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 4ng/L | 3号标准品 | 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 2ng/L | 2号标准品 | 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 1ng/L | 1号标准品 | 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
操作程序总结:

计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。


猪戊型肝炎病毒抗原检测试剂盒注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
猪戊型肝炎病毒抗原检测试剂盒保存条件及有效期
1.试剂盒保存:2-8℃。
2.有效期:6个月
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文献和实验,其次为非甲~非戊型肝炎,而HAV和HEV感染者病死率相对较低。HBV感染者,肝组织内有乙型肝炎病毒抗原表达的病例[HBsAg和(或)HBcAg阳性],其病死率明显高于乙型肝炎病毒抗原表达阴性的病例。但统计学处理无显著性差异。以上观察由于病例数较少,有待进一步扩大研究。 上一篇:应用淋巴细胞转化实验探讨乙型肝炎患者的细胞免疫状态 下一篇:重型乙型肝炎患者丙型肝炎病毒的检测结果与预后探讨
病毒感染标本的采集与送检 (一)原则问题 1.采集最适标本 一般可从病毒侵入部位或感染靶位取材,包括渗出液、分泌物、组织、各种体液、粪便及各种拭子。采集标本需考虑疾病所处阶段,病毒所在部位,非侵人手段能否到达;病损部位能否检出病毒颗粒、病毒抗原、病毒基因序列;该病毒能否培养,生长快慢;需取双份还是单份血清。 2.力争早期 病毒分离及特异IgM型抗体检测应力争在发病早期进行,愈早愈好。 3.尽快送检 大多数病毒抵抗力较弱
而引起香港型流感等世界大流行。病毒抗原由血细胞凝集抗原(数种)和神经氨酸苷酶( 2种)组成,一般认为由于这些抗原的种类和量的配合而出现新的变异株,在 A型中有若干亚型。 B型即使出现新的变异株,抗原的变异是持续的,主要流行于局部地区。使人及猴、豚鼠等各种动物的红细胞凝集。培养主要用发育中鸡卵,在猴、牛等的肾及胎儿培养细胞进行繁殖。感染时经 24— 48小时的潜伏期后发病。 A型病毒除人以外也可从猪、马、鸟等分离出类似的病毒。










