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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
99
- 英文名:
µMACS One-step T7 Template Starting Kit
- 供应商:
北京云肽生物科技有限公司
我们北京云肽生物科技有限公司作为Miltenyi公司的特约经销商为客户提供,正规进口,保证原装正品,货期稳定,折扣好的服务标准。
德国美天旎生物技术公司(Miltenyi Biotec) 秉持著以研究者的专业来服务于研究者与临床专家,致力于推动生物医学发现和细胞治疗。细胞研究、细胞治疗和细胞生产提供解决方案。拥有超过30年的专业知识,涵盖了免疫学、干细胞生物学、神经科学、癌症、血液学和移植工程等研究领域。美天旎还提供全面的科学支持、咨询以及专家培训,致力于协助世界各地的研究人员和临床医生改善人类健康。
美天旎Miltenyi 130-092-943 µMACS One-step T7 Template Starting Kit/µMACS一步法T7模板起始试剂盒,产品简介:
产品品牌:美天旎Miltenyi
产品货号:130-092-943
产品名称:µMACS One-step T7 Template Starting Kit/µMACS一步法T7模板起始试剂盒
产品规格:1 Kit
美天旎Miltenyi 130-092-943 µMACS One-step T7 Template Starting Kit/µMACS一步法T7模板起始试剂盒,产品说明:
µMACS一步式T7模板试剂盒可从有限的生物样本(包括活检或少量细胞)中促进含有T7启动子的双链cDNA的柱内合成。 后续的体外转录(IVT)可以在同一分选柱中进行,从而zui大程度地减少了样品损失,同时可以有效扩增反义RNA(aRNA),以进行微阵列基因表达分析。
详细过程
细胞裂解并清除细胞裂解物后,用µMACS磁珠磁性标记mRNA,该RNA包含一个连接的Oligo(dT)-T7核苷酸序列。由于磁珠的尺寸较小,因此与mRNA分子的poly(A)+尾巴的杂交可在数秒内完成。将样品上样到放置在thermoMACS分离器磁场中的µ分选柱上。洗涤后,磁性标记的mRNA保留在柱子上。即用型逆转录酶混合物被添加到分选柱上,并且thermoMACS Separator设置为42°C,从而能够高效地合成第一链cDNA。随后,包含DNA聚合酶,DNA连接酶和RNase H的第二链合成混合物产生双链cDNA。彻底洗涤后,将纯双链cDNA从分选柱上洗脱下来。可选地,在洗脱cDNA之前,可通过添加T7 RNA聚合酶(试剂盒中不包含酶),在三个小时内在同一分选柱上合成反义RNA。在这种情况下,将扩增的反义RNA洗脱,纯化,并准备用于进一步的应用,例如标记和微阵列杂交。
组成成分:
▪µMACS One-step T7 Template Kit (货号#130-092-866)
▪ thermoMACS Separator (货号#130-091-136)
▪ MACS MultiStand (货号#130-042-303)
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文献和实验Native Chromatin Preparation and Illumina/Solexa Library Construction
(1X PBS containing 0.5 % bovine serum albumin, filtered) T4 DNA ligase (400 U/µL) and 10X buffer Taq polymerase (New England Biolabs) TaqMan PCR master mix (Applied Biosystems) (see Step 38) TE (1X, pH 7.4) Triton X-100
Hematopoietic Stem Cell Targeting with Surface-Engineered Lentiviral Vectors
T cells in DMEM for HSC at a density of 2.5 x 106 cells per 100-mm tissue-culture dish in a final volume of 10 mL/dish. 2. On the day of transfection, use the CalPhos Mammalian Transfection Kit to cotransfect 8.6 µg of the HIV packaging
How do you synthesize your dsRNA
& SP6 or T7 & T3 promoters, each transcription reaction will occur in a separate tube. Follow the Ambion MEGAscript kit protocol and use 5 µl of PCR template per 20 µl reaction. It is not necessary to purify the PCR template before transcription
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