人热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒

人热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。
使用目的：
本试剂盒用于测定种属血清，血浆及相关液体样本中热休克蛋白70(HSP-70)含量。
实验原理
试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。
人热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒组成

1	30倍浓缩洗涤液	20ml×1瓶	7	终止液	6ml×1瓶
2	酶标试剂	6ml×1瓶	8	标准品（32ng/L）	0.5ml×1瓶
3	酶标包被板	12孔×8条	9	标准品稀释液	1.5ml×1瓶
4	样品稀释液	6ml×1瓶	10	说明书	1份
5	显色剂A液	6ml×1瓶	11	封板膜	2张
6	显色剂B液	6ml×1瓶	12	密封袋	1个

标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

试剂盒相关图片：

操作步骤
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

16ng/L	5号标准品	150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
8ng/L	4号标准品	150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
4ng/L	3号标准品	150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
2ng/L	2号标准品	150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1ng/L	1号标准品	150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

操作程序总结：


计算
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。


人热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。

人热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒保存条件及有效期
1．试剂盒保存：2-8℃。
2．有效期：6个月

相关产品：

仓鼠甲状腺结合球蛋白(TBG)ELISA试剂盒	Hamster Thyroxine-Binding Globulin Assay,TBG ELISA试剂盒
仓鼠组织蛋白酶K(cath-K)ELISA试剂盒	Hamster Cathepsin K,cath-K ELISA试剂盒
豚鼠卵清蛋白特异性IgG(OVA sIgG)ELISA试剂盒	Guinea pig ovalbumin specific IgG,OVA sIgG ELISA试剂盒
豚鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒	Guinea pig interleukin 4,IL-4 ELISA试剂盒
豚鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒	Guinea pig Immunoglobulin G,IgG ELISA试剂盒
豚鼠钩端螺旋体IgG(Lebtospira)ELISA试剂盒	Guinea pig Lebtospira IgG ELISA试剂盒
豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA试剂盒	Guinea pig leukotriene D4,LT-D4 ELISA试剂盒
豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)ELISA试剂盒	Guinea pig ovalbumin specific IgE,OVA sIgE ELISA试剂盒
豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA试剂盒	Guinea pig Interleukin-12,IL-12/P70 ELISA试剂盒
豚鼠一氧化/氮(NO)ELISA试剂盒	guinea pig nitric oxide,NO ELISA试剂盒
豚鼠主要组织相容性复合体(MHC/GPLA)ELISA试剂盒	Guinea pig major histocompatibility complex,MHC/GPLA ELISA试剂盒
豚鼠内皮型一氧化/氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒	Guinea Pig Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA试剂盒
豚鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒	Guinea Pig calcitonin gene related peptide,CGRP ELISA试剂盒
豚鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒	Guinea Pig plasmin-antiplasmin complex,PAP ELISA试剂盒
豚鼠血清总补体(CH50)ELISA试剂盒	Guinea Pig 50% complement hemolysis,CH50 ELISA试剂盒
豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒	Guinea Pig Super Oxidase Dimutase,SOD ELISA试剂盒
豚鼠组胺(HIS)ELISA试剂盒	guinea pig Histamine,HIS ELISA试剂盒
豚鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒	guinea pig transforming growth factor β1,TGF-β1 ELISA试剂盒
豚鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒	Guinea pig Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA试剂盒