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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20
- 英文名:
pCMV-SPORT6-ZBTB8OScattle)
- 库存:
999
- 供应商:
圻明生物
- 规格:
管
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;
3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;
4、42℃热激90s,再冰浴2min;
5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;
6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;
8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。
pCMV-SPORT6-ZBTB8OScattle)圻明公司现货供应,可按客户需求单独构建载体,
一、载体构建:
(1)目的DNA片段和载体的制备;
(2)目的DNA片段和载体的连接;
(3)连接产物的转化;
(4)克隆筛选。
(5)测序验证及目标质粒交付
二、详细内容
1、以PCR扩增为基础的各类载体构建,如大肠杆菌表达载体、酵母表达载体、杆状病毒表达载体、哺乳动物表达载体;报告基因载体等;
2、基因定点突变,包括单点突变,多点突变,基因缺失等;
3、载体元件替换和改造;
4、siRNA载体和miRNA表达载体构建;
5、过表达载体构建。
详询客服。公司整合了国外数个基因库资源,具有以下优势:
种属齐全:人、小鼠、大鼠、其它种属;
数量众多:多达几万数量cDNA克隆(cDNA模板质粒)和ORF克隆(ORF表达质粒);
质量优异:保证目的基因序列正确,无氨基酸突变,每个克隆质粒均可提供相应的测序报告;
价格实惠:与您亲自调取基因相比,我们的服务让您更加省时、省力、省心;
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文献和实验pCF-T M13F M13R pCI T7(17Base) 此载体无反向引物 pCI-neo T7(17Base) T3 pCMS-EGFP T7 T3 pCMV-3Tag-4A T3 /PFLAG-CMV-F T7 pCMV5 pCMV5F pCMV5R pCMV5-Flag pCMV5F pCMV5R pCMV-MYC/HA pCMV-F pCMV-R pCMV-Sport M13F/T7 SP6/M13R pCMV-Tag(KAN+) T3 T7 pCR2.1-TOPO
的克隆方法将目的基因克隆进入门载体。 (2)混合包含目的基因的入门克隆和合适的目的载体以及Gateway LR Clonase酶,构建表达克隆。(表达克隆用来在合适的宿主中进行蛋白的表达和分析。) 有几种方法可以构建Gateway入门克隆。无论您选择何种方法,创建的入门克隆都是准备用来与各种目的载体进行重组。 (1)PCR克隆(定向TOPO克隆至入门载体或与供载体B×P重组) (2)限制性内切酶消化和连接进入入门载体 (3)使用pCMV•SPORT6或pEXP-AD502*构建
),绿色荧光蛋白(GFP),荧光素酶(Lux或Luc)以及b-半乳糖苷酶(b-gal)。可以使用简单的非同位素方法检测b-gal的表达以测定转染效率和活性。pCMV SPORT- bgal质粒包含CMV启动子调控下的LacZ基因,转染入真核细胞内后可以直接表达bgal。结合简单的检测步骤,可以做为监测转染条件的一种方便灵敏的方法。 09稳定转染细胞系的筛选 用载体中所含的选择标志进行筛选是建立稳定转染细胞系最常用的方法。抗生素抗性基因可以与目的基因在同一个质粒上,也可以在不同的质粒上。如果两个不同
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









