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文献和实验1. 常用荧光染料的种类特性及检测滤片 面对种类繁多的荧光染料,如何知道这些染料是否适合您所拥有的流式细胞仪,以及这些染料间该如何补偿呢?这需要我们对所用的染料和用于检测的流式细胞仪有清晰的认识。对于多色标记,我们通常需要关注染料的激发波长和发射波长以及探测器前的虑光片参数。其中激发波长决定了目的染料能否在特定配制的流式细胞仪上被激发,发射波长和滤光片参数决定染料的荧光能否在该流式细胞仪上被检测到。一般来说,激发波长在激光器波长附近的染料一般都可以被激发;染料的发射波长落在滤光
相关专题 Bradford法测蛋白质浓度 一、实验目的 配制一组浓度分别为0.10mg/ml ,0.08mg/ml,0.06mg/ml ,0.04mg/ml ,0.02mg/ml,0 mg/ml的牛血清蛋白 (BSA)溶液,测定这组溶液的吸光度,得到蛋白质浓度对吸光度的一条标准曲线。测定未知蛋白质浓度样品的吸光度,根据标准曲线得到蛋白质的浓度。 二、实验原理 考马斯亮蓝(CBB)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马
原理:这一方法基于考马斯亮蓝G-250 有红蓝两种不同的形式。在一定浓度的乙醇及酸性条件下,可配成淡红色的溶液,当与蛋白质结合后,产生蓝色化合物,反应迅速而稳定。反应化合物在465-595nm处有最大的光吸收值,化合物颜色的深浅与蛋白浓度的高低成正比关系,因此可检测595nm的光吸收值的大小计算蛋白的含量。溶液:1)Bradford储存液100ml95%乙醇200ml88%磷酸350mgServaG蓝室温下长期保持稳定。2)Bradford工作液425ml双蒸水15ml95%乙醇30ml88
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