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文献和实验好像现在比较常用的是双报告基因检测吧,可以解决你说的问题 huxueliang 利用双荧光素酶报告基因系统 同时转入内参质粒 天飒 huxueliang 麻烦你讲讲利用双荧光素酶报告基因系统 ,同时转入内参质粒吧,我是一名新手这方面知道的少,谢谢啦! 叮当儿 promega公司的双荧光素酶标记系统,好多人都在用,同时转入要检测的报道基因及Renillia,操作的话说明
生物发光是一种依赖于酶和底物的相互作用来产生光的化学过程。所需的酶被称为荧光素酶,底物因荧光素酶的类型而不同(如荧光素)。 常用荧光素酶信息表: 其中最有代表性的是来自萤火虫体内(Firefly)和海肾(Renilla)体内的两类萤光素酶,分别命名为萤火虫荧光素酶(FLuc)和海肾荧光素酶(RLuc),同时近年来研究得较多的是来源于高斯氏菌的高斯荧光素酶(GLuc)。 萤火虫荧光素酶(FLuc)作为最通用和最常见的报告基因,该蛋白质不需要翻译后修饰即可获得酶活性,可用于原核和真核细胞。FLuc
光素酶在生物体内得到持续表达,注射底物后与表达的荧光素酶反应发光。(自发光,其信号的发射不需要外部光源激发)。目前,比较常用的是萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。 优势: 低背景,避免了小鼠自发荧光的干扰和减少了外界激发光源的干扰 高灵敏度,皮下少量的发光标记肿瘤细胞也可被检测到。如,AniView 100 在实际应用中,可检测到皮下至少 100 个发光标记的肿瘤细胞,但检测到的最少细胞数量与单个细胞的发光强度有关。 不足之处: 标记手段单一,只能通过转基因形式标记细胞、基因 标记物单一,目前主要
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